研究鱼类的使用指南

因为我们关心鱼

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版权2014年由美国渔业协会BOB中国官方下载BOB国际体育

建议引用:
使用鱼类研究委员会(美国渔业协会联合委员会,美国渔业研究所的生物学家,鱼类学家的美国社会与爬虫类)。BOB中国官方下载BOB国际体育2014年。研究鱼类的使用指南。马里兰州贝塞斯达美BOB国际体育国渔业协会。

表的内容

  1. 前言
  2. 确认
  3. 声明的目的
  1. 介绍
  2. 一般考虑
    1. IACUCs批准的研究计划
    2. 项目质量保证计划和标准操作程序
    3. 统计设计
    4. 死亡率作为实验端点
    5. 鱼健康管理:控制病原体和寄生虫
  3. 法定要求和监管机构
    1. 国际法规和准则
    2. 生物安全
    3. 联邦、州和地方法规
    4. 许可和Certificates13
  4. 动物福利的考虑
    1. 一般考虑
    2. 压力
      1. 阶段的压力
      2. 测量和避免压力
    3. 伤害感受和痛苦
  5. 场活动
    1. 栖息地和人口因素
    2. 字段集合
      1. 许可证
      2. 收藏自然历史
      3. 代表性样本
      4. 濒危物种的集合
      5. 博物馆标本和其他保存标本
    3. 住捕获技术和设备
    4. 字段限制鱼类:镇静剂
      1. 药品批准用于鱼
      2. 低管理优先级(含)的药物
      3. 临床实验的新药动物药物(INAD)
    5. 危险的物种和标本
    6. 处理和运输
    7. 临时设施和维护
    8. 领域适应
    9. 血液和其他组织的集合
  6. 标志和标签
    1. 一般原则
    2. 外部标签和标志
    3. 内部标签和标志,生物遥测术
    4. 遗传标记
    5. 稳定同位素
    6. 脂肪酸
  7. 实验室活动
    1. 一般原则
    2. 监禁、隔离和检疫
    3. 适应实验室条件
    4. 鱼类的长期住房设施
    5. 动物的密度
    6. 提要和喂养
    7. 水的质量
    8. 水再循环单元
    9. 废水和许可
    10. 危险的物种和标本被囚禁
    11. 鱼类的克制:镇静剂和相关的化学物质
    12. 外科手术
    13. 管理的药物、生物制剂、和其他化学物质
      1. 药物
      2. 生物制剂及其他化学物质
      3. 化学工厂反恐标准(CFATS)
  8. 实验动物的最后处置
    1. 安乐死
    2. 存储或返回水生栖息地
  9. 未来修订
  10. 文献引用
  1. 附录
  2. IACUC准备简短的清单
  3. 列表管理优先级低的药物和考虑他们的使用
  4. 附录表1。监管低优先级水产养殖药物适应症、剂量
  5. 附录表2。OIE-notifiable诱发疾病代理鱼类和两栖动物
  6. 索引术语和缩写
  7. 注意额外的阅读

前言

BOB中国官方下载美国渔业BOB国际体育协会(AFS),鱼类学家的美国社会与爬虫类(ASIH)和美国渔业研究所的生物学家(AIFRB)专业集中在科学认识和全球社会保护,保护,和可持续性的水生动物,渔业资源和水生生态系统。他们的政策和观点主要是基于信息科学发展实践,但也反映了伦理问题,包括鱼类种群的多样性和丰富,保护和尊重生命和生命过程。在鱼类研究调查,环境中,鱼类的健康和福祉,影响因素和各种各样的人类活动取决于和/或影响鱼类是所有三个社会核心追求。此外,这些社会相信他们的成员不仅负责推进科学知识和理解的鱼类和渔业也为提高人类对这些动物和他们支持的行业。BOB国际体育所有三个社会积极推动研究和传播的信息来源于研究。他们还提倡尊重生命过程,尊重生命的形式在不同的生态系统,和人道对待动物用于研究调查。

鱼类值得实验和观察研究:他们是有用的环境质量和生态完整性指标和个人适应生理专门化使他们适合用作生理和生物医学模型。此外,鱼类是经济重要通过娱乐和商业活动,他们提供了一个人类和其他动物的重要食物来源和流行的捕捉和观察。

指南的作者利用鱼类研究(以下简称指南)是科学家,尊重生命,在众多的学科专业训练。AFS, ASIH, AIFRB支持当前版本的指南的目的援助人员,机构和监管当局在处理负责,科学有效的研究鱼类和鱼类的栖息地。2004指南(使用鱼类研究委员会2004年)取代指南使用的实地研究鱼类(1988年ASIH et al . 1987年)包含的内容相关的实验室研究。当前版本是在回答2004呼吁一个周期的文件审查和更新,与类似的建议指出。

的理解和使用的动物福利的研究可以提供最好通过使用多学科方法的数据来源于生态学等学科和专业知识,行为研究,营养、遗传、毒物学、化学、内分泌学、生理学、解剖学、和鱼的健康。同时,理解研究是人类进行各种各样的文化背景是非常重要的。理想情况下,科学的程序、分析方法、数据解释,根据科学研究和结论应该是一致的在所有文化;然而,个人信仰体系可以影响概念有关的实践和方法,或不符合人道对待动物。2014使用的鱼类研究的一些成员(在这里)委员会同时也在委员会任职,修订了2004年指南(2004年使用鱼类研究委员会)。2004年和2014年指南不仅反映在这里委员会的科学专业知识,还提供了一个框架促进科学有效研究鱼类和鱼类的栖息地和研究在社会可接受的方式进行社区内的研究。

指导解决现场和实验室研究鱼类和将作为一个资源文件主题。具体信息以应对美国的法律是一个重点,然而,这些指导原则可以应用和适应国际调查人员在自己的工作机构基础设施对于动物保健和使用委员会。互联网通路包含各种网站的链接和文档;然而,这样的途径网络媒体可能会发生变化。如果读者经验很难达到一个特定的网站,联系AFS出版物主任(电子邮件保护)

确认

产生2004年和2014年的在这里委员会指南慷慨解囊的时间和专业知识的开发、更新和修改部分。我们感谢琳达·布鲁萨德Jennifer Duke-Sylvester卡西为了,和希瑟鸟鸣声(美国地质调查局(USGS),国家湿地研究中心[NWRC]),蒂芙尼Smoak(学生承包商,NWRC),梅根·霍尔德(承包商、五河流服务,Inc ., NWRC),凯特琳Porubsky(原美国地质调查局科学出版网络)对于引用的援助,c .维多利亚Chachere (USGS科学出版网络)编辑和格式化工作,和NWRC支持。我们感谢同行评议者:维基夹克的美国地质调查局,玛丽马耳他的美国鱼类和野生动物服务(物),理查德·布朗和大卫Geist太平洋西北国家实验室,卡尔Schreck俄勒冈州立大学和美国地质调查局,乔·托马斯·德克萨斯州立大学和霍华德Browman海洋研究所,挪威和杰西Trushenbob娱官网入口ski南伊利诺伊大学的贡献。我们感谢克里斯将岛上的兽医协会有限公司,斯塔福德郡,英国和霍瓦特阿尔卑斯山脉的Szent什大学- -匈牙利国家信息。一个ASIH特设委员会感谢仔细审查和见解:汉克•巴特(椅子),詹姆斯·阿尔伯特·巴里·切尔诺夫布鲁斯颈链,大卫·格林菲尔德院长Hendrickson,凯伦·马丁伊迪Marsh-Matthews,雅各Schaefer和杰奎琳·韦伯。AFIRB董事会控制和史蒂夫Cadrin总统表示感谢。最后,我们承认比尔•费舍尔过去AFS总统任命这里委员会和现任总统罗伯特·休斯在帮助AFS继续推进合理的科学的传统和传播科学全球渔业信息保护、渔业资源保护和可持续性和水生生态系统。BOB国际体育AFS董事会和休斯博士也感谢他们仔细审查。任何使用贸易、产品或公司名称仅用于描述,并不意味着美国政府支持的。

尊重,

吉尔·a·詹金斯的椅子上,在这里委员会,2014年

声明的目的

2004年和2014年指南开发提供一个结构,发展适当的注意力有效的实验设计和程序与水生动物实验对象的同时确保人道对待。在实践层面,该指南旨在提供一般建议现场和实验室努力,如抽样,持有,和处理鱼;提供信息的行政事务,包括法规和许可证;和解决典型的伦理问题,如实验对象对疼痛或不适。这些指导方针必须是公认的的指导方针。他们不打算详细说明,而是向调查人员提供一个广泛的主题和问题考虑开始研究之前。在综合层面,这些指南是建立的原则是普遍适用的,和描述的许多实践和方法可以适应情况涉及其他水生动物物种和条件。

了解鱼类之间的差异和其他脊椎动物,尤其是哺乳动物,是非常重要和鱼类进行科学合理的研究。差距在鱼类生活史和死亡率与其他脊椎动物鱼类种群可持续设计抽样水平的关键。这里委员会指出,(1)哺乳动物种群相比,许多鱼类的成年人口的持续尽管非常高的自然死亡率在青少年阶段的大多数物种成千上万的鸡蛋;(2)因为这些死亡模式,研究鱼类,特别是实地研究或研究生命早期阶段,可以涉及,常常需要,大量研究对象比研究哺乳动物;(3)动物处理和鱼类饲养要求在本质上有别于哺乳动物和其他脊椎动物,。政策、法规和建议开发研究哺乳动物,鸟类,爬行动物,甚至两栖动物经常不适合与鱼类的研究。指南还解决的一些伦理问题,激励原则与其他脊椎动物用于研究,同时留意独特的生理和鱼类的一般性质。

一般使用的指导方针是在美国调查人员;因此,角色、责任、制度和信息需求的动物保健和使用委员会(IACUCs)有特定的关注。所有美国机构使用研究脊椎动物,生物实验教学、科研训练,需要创建一个IACUC监督和评估机构的方方面面的动物保健和使用计划。调查人员从其他国家阅读这个文档可能忽视特定引用美国州和联邦法规,制度基础设施和流程可能不同于那些IACUCs等内部委员会。然而,所述原则适用于研究鱼类与地理位置无关。调查人员在其他国家可能受益通过修改的任何具体规定属于美国,从而采用准则符合本国政府的法律法规。在这里委员会敦促指导方针被认可和采用(改编,在必要时)的州和联邦当局对鱼类监管职责,与联邦监督办公室(例如,国家卫生研究院办公室实验室动物福利;http://grants.nih.gov/grants/olaw/olaw.htm)以及由大学和其他机构和部门使用鱼类和水生动物在其研究和教学项目。

1。介绍

使用现场实验研究,完整的生物体在发展中继续发挥重要作用的知识和更好的理解生命过程,生命形式,它们发生的环境。巨大的鱼类进化辐射包括至少27000种尼尔森(2006)。鱼类中存在多种形式,有许多独特的生理、行为、生态专门化。鱼类占领不同的细分市场几乎在每一种水生栖息地。了解他们的生物不能在没有完成的实验生活,完整的动物。

研究鱼类的原因包括以下几点:鱼是有用的环境质量和生态完整性的指标;鱼提供一个重要的食物来源,许多世界上的人类和陆地动物和其他水生动物的一个重要的食物来源;鱼是一种水生环境和生态系统的重要组成部分;捕捉和观察鱼很受欢迎和经济上重要的娱乐和商业活动数以百万计的世界各地的人们;独特的适应性和生理专门化的鱼使其特别适合用作生理和生物医学模式;和人类努力理解的角色不同生物在地球生态系统必须包括准确和详细的鱼类的生物学知识。

27000 +种鱼类的多样性表明为新的研究创造了许多机会,但也使发展的任务研究协议,将适用于所有物种和任何情况下不可能的。相反,广泛建立在最新的指导方针,科学有效的解释和应用指南中提供的信息通过各种调查人员经常是权威的物种或系统参与研究。最终责任伦理和科学有效性的研究和使用的方法取决于研究者;然而,政府机构,反映公民的信仰和价值观和代表,往往要求调查人员遵循法规规定可接受的策略,技术、设施、条件,以及后来的处置动物用于研究。

一些人认为,鱼不应包含在法律和政策主要针对哺乳动物和鸟类;然而,卫生研究扩展行为(HREA) 1985(公法99 - 158 1985,http://history.nih.gov/research/downloads/pl99 - 158. - pdf在其管辖范围内)包括鱼类和责任。1985年关于HREA的附加信息和公共卫生服务政策人道关怀和使用实验动物(2002年实验室动物福利办公室,http://grants.nih.gov/grants/olaw/references/phspol.htm)可能会通过网站访问美国卫生和人类服务部(USDHHS;http://www.hhs.gov/)国立卫生研究院(NIH;http://www.nih.gov/)市外的研究办公室(OER;http://grants.nih.gov/grants/oer.htm)。鱼特别包括的范围内的护理和使用实验室的指导Animals-Eighth版的实验动物研究所(ILAR)(2011年NRC,http://www.aaalac.org/resources/theguide.cfm),地球上的分裂和生活研究,国家科学院的国家研究委员会。法律和其他指南,如ILAR指南(2011年NRC)提供通用材料解决鱼类或其他变。ILAR准则明确要求详细的信息知识组织的发展。一般来说,社会科学专业知识在特定类型的脊椎动物被认为是最合适的资源实现现有政策所需的补充信息。

pre - 2004版本的这些指南,指南的使用鱼在实地研究,开发,共同发表的美国社会的鱼类学家与爬虫类(ASIH),美国渔业协会(AFS)和美国渔业研究所的生物学家(AIFRB)(1988年ASIH et al . 1987年)。BOB国际体育1987年和1988年指南强调实地研究,和2004年指南添加材料在实验室研究鱼类。2004年的指导方针是因此发达的公共卫生服务(小灵通)扩大他们的“动物”的定义包括活脊椎动物用于研究或旨在用于研究(公法99 - 158)。2014年准则扩展了2004年的指导方针提供了更新与新知识和信息提出了在过去的十年。一个清单,协助调查人员准备制度动物保健和使用委员会(IACUC)应用程序仍然是2014年这些指导方针(见附录)。

2。一般考虑

某些总则适用于几乎所有的鱼类的研究调查,是否在现场或实验室进行设置。本节介绍的概念和过程,可以适应每个调查员的情况和环境。

研究应该易于理解和合理的目标地址,上下文中研究的学科,基本需要的知识和理解我们生活的世界和考虑的特定资源。在鱼类的生物学的情况下提出了研究是众所周知的,一个研究假说应该铰接,鱼类的使用是专注于解决这个假设。如果鱼类的生物学不是众所周知的,一般抽样和其他观测使用的鱼类(例如,而不是假说驱动的)可能是必要的指导发展的一个良好的学习的假设(见部分5.2字段集合)。仔细研究质量依赖于沟通的问题,可以通过科学方法来解决和研究的发展过程,质量控制,可发表的和可重复的。准则改进的报告发表在动物研究和再现性增加(基尔肯尼et al . 2010;看到到指导方针,http://www.nc3rs.org.uk/page.asp?id=1357;参见3.1国际法规和准则)。

研究结果的有效性影响的实验设计,采用的分析方法,实验对象的质量和健康状况。质量和使用的适当性鱼类,物种和个体,会严重影响结果和结论,从而有显著影响的动物数量需要和研究重复的次数。反过来,这些影响将动物福利和金融有重要影响。研究科学家早就认识到动物福利的重要性考虑;然而,正式的使用指南鱼的研究是不常见的在美国在1985年之前,当需求,研究建议批准IACUC实施(公法99 - 158 1985,http://history.nih.gov/research/downloads/pl99 - 158. - pdf)。尽管这些指南中描述的原则和程序被设计来处理由IACUCs需求在美国,一般的概念在全球适用于调查人员。

2.1 IACUCs批准的研究计划

当批准一个IACUC是必需的,调查人员必须准备书面声明或动物使用,确保所有应用程序请求,建议,和实际研究将满足某些基本需求(Silverman et al . 2007年)。保障措施包括限制不必要的复制的研究,使用适当的物种和动物的数量,一个适当的实验设计,安乐死的方法或处置完成后动物的研究。调查人员必须熟悉研究的物种,或密切相关的代理人,以便能够提供环境条件对于实验对象的福祉和能够认识到他们的反应障碍,包括捕获、克制,或其他环境条件的变化,可能适用于特定的研究中。IACUC-approved研究计划的副本从赞助由IACUC维护设施,以及由个人调查员。

IACUC Post-approval监控协议的要求的联邦法律,法规和政策;允许修改的研究程序/协议;并确保动物的福祉。

2.2项目质量保证计划和标准操作程序

项目质量保证计划(PQAPs)和标准操作程序(sop),而不需要通过许多大学或非政府机构,不过推荐作为维护整体研究质量的有用工具。PQAPs和标准作业程式通常需要如果研究的数据和结论将提交特定的监管机构,如美国食品和药物管理局(FDA,http://www.fda.gov/)或美国环境保护署(EPA,http://epa.gov/)。

PQAP应该包括一个描述项目的设计和解决问题的方法,预期成果的一份声明中,描述如何报道的数据(例如,作为单独的测量或减少形式)。PQAP文件的原则、政策、组织职责、目标、实施行动,和问责程序将确保一个适当的质量过程在一个研究项目。紧急联系人及应急计划可能包括在PQAP动物照顾。重要的是,PQAP应该描述的行为将被用来控制/验证实验程序,确保结果的代表实验参数的评价。PQAP应该确定未经授权的实验室人员或研究项目区域将如何控制和生物安全维护。研究涉及领域抽样,PQAP应包括抽样计划概述的方法,设备和程序,以及人员的安全程序。实验室研究、样品制备和分析方法应该被指定。常规标准操作规程、专业或未发表的方法应该被识别。数据质量目标应确定为每一个测量参数,使用和质量控制程序,是否在现场或在实验室条件下,应该说。纠正措施应指定应该出现问题。 Finally, a quality assurance (QA) report should be generated at the conclusion of the study. This report should include a summary of the PQAP, results of technical systems and performance evaluation audits, corrective actions taken and results of those actions, data quality assessments (precision, accuracy, representativeness, completeness, comparability, and reporting limits), a discussion of whether the QA objectives were met, and limitations on use of data collected during the research.

标准作业程式文档程序或重复性的技术活动,或偶尔发生的那些需要按照准确的时尚与前面的时间。理想情况下,安抚确保第一次工作正确完成,从而减少不必要的重复和成本。如果研究数据生成的设置,还使用了相同的程序人员改变随着时间的推移,安抚帮助维持一致性。一些机构保证标准操作规程的要求,求职者能够执行所需的任务。标准作业程式也可以形成有效的培训项目的重要组成部分。通用标准作业程式,可设立非特定的个体研究,为整个研究实验室或机构的基本步骤。特定的技术标准作业程式的任务是有用的例子进行研究鱼类包括血液取样,疫苗接种协议,electrofishing程序,使用镇静剂解决方案的准备,收集比率的数据的技术。政策需要遵守标准作业程式和PQAPs研究协议允许开发新程序和建立程序的修改或扩展,新的研究技术开发。附加信息在安抚和PQAPs有指导文件从EPA(美国环保署2007年,指导准备标准操作程序(sop),http://www.epa.gov/quality/qs-docs/g6-final.pdf或环保局2002年,指导项目质量保证计划,http://www.epa.gov/quality/qs-docs/g5-final.pdf)或FDA(有关质量保证和安抚的各种问题和答案都包含在2007年FDA指导Industry-Good实验室实践问题和答案,http://www.fda.gov/downloads/ICECI/EnforcementActions/BioresearchMonitoring/UCM133748.pdf),从各种质量保证手册或文本地址。此外,美国鱼类和野生动物服务(物,http://www.fws.gov/水生动物药物批准伙伴关系(AADAP)项目(http://www.fws.gov/BOB国际体育fisheries/aadap/home.htm)在线安抚(http://www.fws.gov/BOB国际体育fisheries/aadap/AADAP_Protocols_and_SOPs.htm)。

2.3统计设计

固有的使用动物研究的责任是高效、有效的设计实验研究,在健康动物没有异常如若和行为将促进研究的结果,和人道的治疗实验对象(克朗茨和史密斯1968;Snieszko 1974;Klontz 1995;2011年NRC)。研究目标应该明确表示,应当提供和解释需要的类型和数量的数据收集,以及什么构成结束实验。

动物主题调查所需的数量将取决于正在研究的问题。现场研究和实验室研究通常需要大大不同的统计设计。鱼的生命阶段在每个研究中使用也会影响所需的数字。研究生命早期阶段可能需要非常大量的个人。在所有情况下,研究应该被设计用最少的动物必须可靠地回答这个问题。使用足够的数据建立方差和保证可靠性是至关重要的,以防止不必要的重复的研究(1988年ASIH et al . 1987年)。一个真正的“复制”是最小的实验单位独立治疗可以应用。Pseudoreplication会导致错误地将多个样品从一个实验单位为多个实验单位或者使用实验单元不统计独立(凯西et al . 1996年)。统计能量分析可以提高设计的实验(渔夫1990)。进行统计能量分析确保发展的研究设计,有适当的统计力量来完成研究目标。

2.4死亡率作为实验端点

在实验室研究中,实验的端点,除了死亡的实验对象,应该开发除非死亡率研究方案的要求。使用死亡率的端点是合适的,当一个或两个满足以下条件:(1)很少或根本没有研究目标有关的信息可以在感兴趣的物种或实验变量实施(如短期、有限的死亡率的研究可用于开发实验后续亚致死的研究限制),和(2)死亡率数据是必需的,或者至少是首选,赞助机构提供一个依据标准开发作为监管过程的一部分。研究要求死亡率端点包括,但不限于,那些关于病原体和寄生虫的影响,毒理学研究,生理上的宽容。

2.5鱼类健康管理:控制病原体和寄生虫

在实验室研究包括鱼类,健康受试者先决条件可靠数据(2011年詹金斯),除非传染病是实验性的协议的一部分。鱼必须无任何显著的用于研究微生物的存在,表明病变的情况。鱼鱼免受传染性病原体通常会令人满意;然而,一种不为人知的疾病状态,即使在慢性或非杀伤性的水平,严重混淆研究成果(劳伦斯et al . 2012年)。鱼的来源用于研究,一般来说,影响他们的健康状况。人工饲养的鱼有一个水平的卫生监督,不会发生在野生鱼。当询问健康状况的鱼文化设施,研究者可以请求特定的信息,包括任何可用鱼健康检查报告。当鱼被带进实验室设置从野生环境中,研究者应该期望微生物存在。如果没有疾病症状是明显的,这是不能保证这些野生鱼是免费的从问题的病菌。一旦这些鱼是在实验室环境中,文化环境和相关的压力将非常不同于在自然环境中,即一个活跃的疾病事件可以开发。 Many laboratories will administer formalin baths to newly arrived fish during an acclimation period (see section7.3适应实验室环境)。我们的目标是消除外部原生动物和monogeneans鱼。这是不可取的,鱼是经常服用抗生素细菌病原体,这种做法可能导致抗生素耐药细菌的发展。

任何鱼死在实验室环境下应该进行适当的诊断评估个人专长鱼的健康。确定原因的死亡率将极大地帮助发展卫生设施管理协议。实验室殖民地的鱼保持在一个长期的基础上,一个监控程序,可以设立一个有限数量的鱼选择定期对病原体诊断评估,以确定是否有任何问题。与性能的诊断评估死亡率一样,数据通过监测工作提供有价值的信息关于如果病原体存在于一个殖民地,这样适当的管理实践可以实施限制任何影响。研究者应该咨询与个人专业知识在鱼类健康和/或兽医负责健康管理设施的进一步信息。

事实上,captive-reared和野生鱼类,调查员可能希望找到各种传染性生物体。这种传染性生物体的存在可能不会引起疾病或防止使用宿主鱼的研究,但他们的存在必须评估的相对重要性可能对研究结果的影响(温顿2001)。测试特定病菌或寄生虫可能是必要的。诊断程序不断地改善和允许更大的信心,病原体的担忧不存在或不存在数量巨大的足以影响研究结果的准确性和可靠性。它可能是不现实的,认为鱼是“无病原体”除了某些特殊情况的人工繁殖的物种。应该采取措施在咨询健康专家或兽医来解决任何鱼健康问题的方式提供了鱼的健康和福祉,也支持这项研究。

如果一种疾病条件实验设计的一部分,病原体和寄生虫的潜在影响研究结果应可预见的或构成变量通过研究正在测试。如果鱼是治疗疾病的治疗性化合物研究开始之前,他们不应该被使用,直到足够的时间已经过去,消除任何残留的治疗。考虑其他影响治疗的代表地位的主题鱼必须包括在研究的设计和分析的数据来源于学习。

如果实验鱼治疗疾病,应该使用FDA批准的药物和现行的FDA法规遵循联邦法规(CFR)的(代码2012),尽管相当大的灵活性是由FDA实验室环境中进行研究。此外,兽医可以开出头孢菌素药物在某些情况下的使用。机构、当地或国家指导方针有关药物的管理必须遵循、环保局、州和地方法规有关污水排放,可能含有药物也必须遵守。在这里委员会认识到,许多药物和疾病的治疗已经使用在过去与某种程度的明显成功在打击疾病的迹象;然而,在这里委员会认为,相当大的应该注意使用任何药物,没有得到FDA的批准。有些化合物尚未被批准,但可以用于鱼合法访问(例如,产品包括合法销售未经批准的新指数的小物种动物药品、药物在临床实验的新动物[INAD]豁免)。此外,未经批准的药物“低监管优先”(含)可以使用,如果某些条件得到满足(FDA 2011;看到附录表1)。请参见7.13节管理的药物、生物制剂、和其他化学物质的额外细节选项关于吸毒的鱼类。物质的列表看起来有效但尚未批准的不包括因为危险,这种包含可被误解为对未经批准的药物。鱼类对物质没有被FDA批准的不能被释放或消耗。

必须保持完整的记录所有的疾病治疗,因为FDA检查员可能下令对这些文件进行审查。批准治疗化合物信息表或标签,指定指导与鱼类物质的使用。研究旨在研究功效,安全鱼、人类安全、或环境安全的疾病治疗与FDA应该设计咨询中心的兽医,最终得到他们的赞同。如果鱼可能最终被释放或者他们可以成为人类消费食品,当务之急是FDA法规详细观察。额外的信息可能从网站获得美国食品和药物管理局(http://www.fda.gov/)和EPA (http://www.epa.gov/)。

3所示。法定要求和监管机构

调查员必须知识有关的所有规定的动物研究,以及生物安全问题,必须获得所有必要的许可实施提出研究(1988年ASIH et al . 1987年)。合规的责任在于机构,最终,首席研究员。

3.1国际法规和准则

调查人员以外的美国工作应该遵守所有野生动物的规定的国家研究执行。与许多物种是由国际濒危物种贸易公约规定野生动植物(引用;http://www.cites.org/),一项国际协议,目的是确保标本的野生动植物国际贸易不会威胁到他们的生存。引用促进“野生动植物的许多美丽的和多样的形式不可替代的地球的自然系统的一部分,必须得到保护,并世世代代”(引用了1979年,http://www.cites.org/eng/disc/text.php)。交易范围从活的动物大量的野生动物产品,包括鲟鱼鱼子酱。引用网站包括物种数据库和地图。公约的文本在华盛顿完成。,在1973 following a 1963 resolution adopted by members of World Conservation Union. Member countries (Parties) adhere voluntarily, and when they have “joined” CITES, they are legally bound to implement the Convention. The regulations of the Convention, however, do not replace national laws; rather, they provide a framework to be respected by each Party. Each Party then adopts its own domestic legislation to ensure that CITES is implemented at the national level.

动物和动物产品国际贸易要求规定旨在防止传染性疾病传播的动物个体,群体的动物,和人类之间(Jenkins 2011 b)。疾病风险应该评估和采取的预防措施,以减少风险转移(1996年Cunningham)野生动物之前(见章节3.2生物安全,7.2隔离,隔离检疫)。世界动物卫生组织(原名办公室国际des既往;世界动物卫生组织,http://www.oie.int/),创建于1924年,总部设在巴黎,是一个领导者在定义国际动物卫生标准,目前近200个国家的成员。重点包括全球动物健康和疾病和兽医科学信息的传播。他们发布两个码(陆生、水生)和两个手册(陆生、水生)。准则旨在保证卫生安全的动物及其产品的国际贸易。水生动物卫生代码(世界动物卫生组织2012,http://www.oie.int/en/international-standard-setting/aquatic-code/)地址动物卫生和人畜共患病、动物生产、食品安全、动物福利。水生动物的人工诊断测试(OIE 2013,http://www.oie.int/en/international-standard-setting/aquatic-manual/access-online/)描述了国际公认的实验室技术。(见附录表2在鱼类和两栖动物的OIE-notifiable疾病)。

经济合作与发展组织(OECD,http://www.oecd.org/),总部设在巴黎,34个成员国和促进打算改善经济和社会福利的政策。出版物通过经合组织解决鱼类和渔业政策与全球化的主题包括渔业和毒理学测试指南。BOB国际体育这些出版物考虑可持续社区和动物福利问题。年度报告、简报、工作文件、指导方针、最佳实践和法律文书可以通过经合组织的网站。

国家可能参与国际渔业论坛等组织通过联合国粮食及农业组织(粮农组织,BOB国际体育http://www.fao.org),海洋和渔业工作组的亚太经济合作BOB国际体育组织(亚太经合组织、bob娱官网入口http://www.apec.org),南极海洋生物资源保护委员会(camlar——http://www.ccamlr.org)。指南编写的特定国家可以通过接触研究这样的国际机构。

在欧盟(EU), 27个国家的活动和合作关系是基于法治,即条约和约束力的协议支持。活的动物保健和使用的科学目的,欧盟委员会(欧盟的执行机构)已经促进了替代的“3 r”原则,减少和细化。“3 r”原则打算促进替代方法,减少动物使用和完善动物程序(欧盟2010;参见2。一般考虑)。这项法案旨在消除成员国之间的差距的法律、法规和管理规定的保护动物用于实验和其他科学的目的,从而减少贸易壁垒涉及产品和物质的研究。脊椎动物的具体指南。第四十九条规定,各会员国是建立一个全国委员会保护动物用于科学目的。收购委员会提供建议,育种、住宿、保健、和使用动物科学程序,从而确保最佳实践的使用和分享(欧盟2010)。例如,修改1998年的匈牙利法第二十八章的保护和人道对待动物调节使用动物进行科学研究(第二十八章行动1998;政府法令243/1998(十二世。31日)1998;联合农业部和区域发展的法令,环境,与中国经济36/1999 (IV.2) 1999号)。在欧盟法律文件是可用的在线(http://eur-lex.europa.eu/)。在英国,2006年更新的动物福利法案(英国环境、食品和农村事务部(Defra) 2006)包括所有的脊椎动物,包括鱼类。在59项,钓鱼,这属于捕捉鱼和着陆,排除;然而,责任经营渔业和鱼类的福利包含在其中并不排除2006年(Defra)。中心的环境、渔业和水产养殖科学(Cefas,BOB国际体育http://www.cefas.defra.gov.uk/),一个Defra的执行机构,适用于科学实体提供科学建议,进行研究,促进国际关系。一个额外的资源是鱼兽医协会(阵线,http://www.fishvetsociety.org.uk/为兽医),一个论坛,鱼卫生专业人员和兽医的学生。阵线促进鱼护理和健康管理多个设置,包括那些观赏植物。

在澳大利亚,农业部(http://www.daff.gov.au/)中扮演一个重要的角色在促进生物、经济、和社会可持续性的澳大利亚渔业和提供大量的渔业社区服务和资源,包括进出口国家的生物安全问题。BOB国际体育渔业研发BOB国际体育公司(FRDChttp://frdc.com.au/research/Pages/default.aspx)是一个伙伴关系政府和澳大利亚研究渔业和水产养殖行业的合作伙伴。澳大利亚渔业管理局(AFMA,BOB国际体育http://www.afma.gov.au/)建立研究优先级(http://afma.gov.au/resource-centre/reesearch/research/),被定义的立法和政策主要是在1990年代(http://www.afma.gov.au/about-us/legislation-and-policy/)。

在加拿大,加拿大的动物保护协会(CCAC,http://ccac.ca/)负责的道德使用动物科学。由一个委员会20多个国家的代表组织,CCAC是集标准的“准监管“今后应当身体通过指导文件和政策声明在动物科学使用。CCAC指南的护理和使用鱼(CCAC 2005,http://ccac.ca/Documents/Standards/Guidelines/Fish.pdf)是为了增加使用鱼作为实验对象。加拿大食品检验署(CFIA,http://www.inspection.gc.ca加拿大渔业和BOB国际体育海洋部门)和(http://www.dfo-mpo.gc.ca)负责开发控制指南鱼病原体。

3.2生物安全

生物安全可以被定义在许多方面(福尔克et al . 2011);的过程采取预防措施来减少风险的介绍和传播传染性生物体或在人群中。粮农组织定义了生物安全战略和综合的方法,包括分析和管理风险的政策和监管框架的行业食品安全、动物生命和健康,和植物的生命和健康,包括相关的环境风险。粮农组织宣称,“生物包括植物害虫的引入,动物害虫和疾病和人畜共患病,介绍和释放转基因生物体(GMOs)和他们的产品,和侵入性外来物种的引进和管理和基因型”(2013年粮农组织,http://www.fao.org/biosecurity/)。疾病发生取决于动物的健康,环境的状况,一种病原体的存在水平足以影响健康(见部分7.2隔离,隔离检疫)。“生物安全”一词也与环境相关的生物多样性。一般来说,规定,适当的许可(见部分3.4许可和证书)和其他具体问题着手解决一个国家内部生物安全指导方针文档内。新西兰,凭借其独特的地理隔离和经济农业基地,有大量的立法处理生物安全问题(生物安全法案》1993年)。

各种情况下持有生物安全问题对于使用鱼。这些包括国家、地区、国家以及国际转移的鱼和鱼产品、水产养殖生产,装饰行业。实施生物安全在全球层面和组织工作在其中被Scarfe划定(2003)。生物安全是一个动态的学科,因为诊断技术的进步和知识的流行病学和发病机理。当考虑低温贮藏配子和水生物种的生命早期阶段,生物安全实践使人工产卵安全地传递遗传学方法。问题涉及疾病传播,引入外来物种,对目标物种的遗传影响,对生态系统和遗传后果(Tiersch和詹金斯2003)。微生物(见5.9节收集的血液和其他组织)在档案样品可以通过降低细胞质量危及宝贵的种质资源(Jenkins 2011 b)。病原体的控制策略是一个关心小鱼模型用作生物医学模型,尤其是斑马鱼鱼类(也称为斑马鲐鲐鱼类),日本青鳉Orzyias latipes,属的物种Xiphophorus(劳伦斯et al . 2012年)。当代国际和国家监管框架、条约、伙伴关系、和协议解决水生动物和水产养殖产品的转移可以适应机制固有的独特的时间和地理生物安全问题的监督情况。一些国家可能已经规定,可能与世界动物卫生组织建议和欧盟要求,活动的哺乳动物人工授精产业。此外,核心机构生物安全租户可能是必要的在实现遵守国际法规。

3.3联邦、州和地方法规

在美国,联邦权力的使用动物研究发现主要集中在两个机构,是美国卫生和人类服务部(美国卫生和公众服务部;http://www.hhs.gov/)和美国农业部(USDA);http://www.usda.gov/wps/portal/usda/usdahome)。如果濒危、威胁或候选物种清单,美国内政部(http://www.fws.gov/endangered/)或美国商务部(http://www.nmfs.noaa.gov/pr/)有额外的当局。机关各部门在国会的具体行为。公共卫生服务的立法授权(小灵通;http://www.usphs.gov/)政策用于动物的研究是由1985年的卫生研究扩展法(公法99 - 158 1985,http://history.nih.gov/research/downloads/pl99 - 158. - pdf)。这个法案指控卫生和人类服务部部长的责任建立指导方针,用于研究和适当的护理和治疗动物组织和操作动物保健委员会。在行动,“动物”被定义为“任何生活脊椎动物使用或用于研究、培训、实验,或生物测试或相关用途。“小灵通人道关怀政策和使用实验动物(2002年实验室动物福利办公室,http://grants.nih.gov/grants/olaw/references/phspolicylabanimals.pdf),于1985年颁布,包括美国政府利用原则和护理的脊椎动物测试,研究和培训。这提供了一个框架进行研究按照小灵通的政策。小灵通要求机构使用指南的护理和使用实验动物(2011年NRC,http://www.aaalac.org/resources/theguide.cfm)。

动物福利立法授权,由美国农业部,包含在动物福利法案(远),修订的(7南加州大学,2131 - 2156年)。1970年离开修正案(公法91 - 579 1970,http://awic.nal.usda.gov/government-and-professional-resources/federal-laws/animal-welfare-act)扩大动物的列表包括所有温血动物,由农业部长,被使用或用于实验或展览除了马不是用于研究和农场动物用于食品和纤维的研究。尽管鱼类不包括在那边,调查人员应该熟悉那边的一般内容和意图。完整的离开,包括所有的修正案(1970年、1976年、1985年和1990年)1966年颁布后,可以在美国找到代码(2012)。美国农业部规定实施那边可以在CFR (2013)。编译鱼福利相关的信息来源可以从美国农业部(埃里克森2003,http://www.nal.usda.gov/awic/pubs/Fishwelfare/fishwelfare.pdf)。

美国农业部动物福利信息中心(http://awic.nal.usda.gov/那边规定)是为改善动物保健和使用提供信息研究、测试、教学、和展览。建立一个IACUC与这两个角色的描述,介绍了组成,美国农业部和责任(副局长的办公室,工作人员2002年国家项目,http://www.afm.ars.usda.gov/ppweb/pdf/130 - 04. - pdf)。编译信息来源相关的生物医学研究和两栖动物,鱼类和爬行动物模型是可用的(克劳福德et al . 2001年,http://www.nal.usda.gov/awic/pubs/amphib.htm)。原则和程序控制的研究、测试和教学活动涉及实验动物在退伍军人事务部是可用的(退伍军人健康管理局2011年,http://www.va.gov/vhapublications/ViewPublication.asp?pub_ID=2464)。鸟类委员会已经在线指南使用野生鸟类的研究(公平等。2010年,http://www.nmnh.si.edu/BIRDNET/guide/index.html),美国Mammalogists协会有一个使用野生哺乳动物研究赛克斯et al . 2011年,http://www.mammalsociety.org/uploads/committee_files/Sikes%20et%20al%202011.pdf)。

1985年食品安全法案》,副标题F-Animal福利(公法99 - 198 1985,http://awic.nal.usda.gov/public -法律- 99 - 198 -食品安全-行为- 1985 -副标题- f -动物福利),也称为改进标准实验动物行为,表明最低要求等细节的卫生、住房、和通风。该法案规定,程序可能会导致痛苦(见第四节。动物福利方面的考虑)在实验过程和最小化替代这些程序被认为是由首席研究员。它还指定了消除或最小化不必要的重复实验动物来帮助减轻公共关心实验室动物护理和治疗。

国家和部落当局可能有具体的法律法规,赋予他们权力,使其规范使用的动物研究。通常情况下,这样的规定可能被发现在法律与自然资源、健康和农业使用的鱼类和野生动物并可通过适当的政府机构。州际运输的鱼类,在某些情况下,州内的运输,是在州一级监管。调查人员要求确定哪些法律可以申请他们的研究行为。地方政府很少监督的行为研究;然而,调查人员应该认识到地方性法规相对于行为的研究可能存在。

3.4许可和证书

除了政府法规有关的行为研究,许可通常动物的运输需要跨国家或国际边界(见3.2节生物安全)和废水的排放限制操作(见部分7.9废水和许可)。在美国,州际运输的权威鱼类通常是管辖的州的鱼和野味机构,就像一个“采取“钓鱼或其他方法需要一个许可证(见5.2节字段集合)。文档可能需要运输或运输跨越州界,收到货物,有时为州内的运输。所需许可证通常是有害的或入侵物种。物是一种资源对进口商和出口商(http://www.fws.gov/le/ImpExp/Info_Importers_Exporters.htm)。许可证需要法律文件(http://www.fws.gov/permits/ltr/ltr.html),联邦注册文件(http://www.fws.gov/permits/FederalRegister/FederalRegister.html),和条约(http://www.fws.gov/laws/lawsdigest/treaty.html)被充分为了帮助节约保护资源。其中很多是直接适用于渔业调查人员,包括引用条款,西北大西洋渔业条约(国际公约西北大BOB国际体育西洋渔业[ICNAF] U.S.T. 477;T.I.A.S. 2089)和五大湖条约(大湖渔业公约之间的美国和加拿大;BOB国际体育6 U.S.T. 2836;T.I.A.S. 3326)(信息可在有关这些主题和其他条约http://www.fws.gov/laws/lawsdigest/treaty.html)。

在某些情况下,管辖州际和国际运动下的鱼类可能是动植物卫生检验署(蚜虫,http://www.aphis.usda.gov/美国农业部的)。本条例的目的是防止外来病原体的引入,以及解决问题与濒危或受威胁物种的动物。指南解决进口生活和死鱼,以及配子,标题中发现50(野生动物和渔业)部分16 CFR 2008 (BOB国际体育http://www.ecfr.gov/cgi-bin/retrieveECFR?gp=1&SID=7a0d8ba4c403a707edcd008028e3e519&ty=HTML&h=L&n=50y1.0.1.2.10&r=PART)。《雷斯法案》(《美利坚合众国法典2010;http://www.gpo.gov/fdsys/pkg/uscode - 2010 title16/pdf/uscode - 2010 - title16 chap53 sec3371.pdf)打击贩卖“非法”野生动物,鱼,和植物。法律禁止非法捕获或禁止动物的运输跨越州界和地址引入外来物种造成的潜在问题。关于食品,那些寻求进口鱼类水产养殖产品和生活/生贝类从欧盟需要查阅国家海洋和大气管理局海鲜商务部的检验程序http://www.seafood.nmfs.noaa.gov/)。

4所示。动物福利的考虑

4.1总则

研究涉及生活的动物,包括鱼类,必须基于实验设计和动物保健实践会导致科学有效的结果。鱼类是相当敏感的压力(例如,巴顿和Iwama 1991),和响应可能包括行为的变化(例如,马丁斯et al . 2012年),减少增长,渗透压的变化状态,抑制免疫系统(顺向疾病发作),和改变生殖能力(Iwama et al . 2006;Schreck et al . 2001;Schreck 2010)。因此,除非实验目标要求的行为或条件设计测试反应压力,鱼应该维护,处理,和测试的情况下,将不会创建这样的回答。地址的行为科学研究的指导方针,重点是建立了事实和知识的过程。研究计划提交给IACUCs应该解决动物保健因素,除了细节的研究目标,目标,和程序。IACUCs的程度将有关动物福利的个人价值观纳入制度准则确定在每个机构。

4.2压力

压力的研究集中在动物进化的生理和行为的机制来应对不断变化的环境条件的挑战,然后允许他们保持体内平衡,或自我维持的平衡。环境变量的设置(条件)最适合每个物种通常包含一个特定范围的福祉为每个因素和物种(见5.7节临时设施和维护),应激反应具有种特异性(Schreck 2010)。因此,当鱼这些范围内维护,预计稳态平衡的状态。偏离稳态应力响应的特点。虽然许多定义提出了压力,我们采用的定义Schreck(2000)和Schreck et al .(2001):“生理级联的事件发生在生物体试图抗拒死亡或重建自我平衡的规范的侮辱。“当强调,鱼通常试图重建体内平衡通过过程称为“拮抗平衡监管即他们调整他们的生理功能重建一个动态平衡”(1988年英镑和注视者)。而拮抗平衡一般自适应,因为它即能让动物活着面对短期压力源(s),它可以长期适应不良和对经济增长有负面影响,繁殖,免疫健康(Schreck 2010)。因此,调查人员需要了解这些因素,可能会导致压力实验动物(s),潜在的后果,如何避免压力通过优化实验条件。

每个调查员和IACUC应该理解物种的条件,减少压力的问题。分类单元之间的外推法,然而,必须避免因为物种间存在差异(Schreck 2010)。条件的因素和范围适合鱼类通常将大幅偏离那些用于哺乳动物。假设基于哺乳动物的经历和看法,尤其是灵长类动物,不能外推到鱼;然而,调查人员应该意识到蚜虫政策(即。农业部政策11日,2011年,http://www.aphis.usda.gov/animal_welfare/policy.php?policy=11)。

4.2.1阶段准备的压力

应激反应后引起鱼检测到一个威胁。认识和理解压力的三个阶段是很重要的。每个权证在动物保健协议的设计考虑:

  • 主要压力反应各有不同物种间但具有直接的神经内分泌反应包括儿茶酚胺和皮质类固醇通过测量血液激素释放,可以量化。有时行为变化伴随这些内分泌反应帮助动物应对压力,本身,很少有对健康的后果。
  • 应激反应的第二阶段的特点是血液和组织功能的变化诱发的主要反应。次重音通常在几分钟内发生的主要反应,特点是增加血糖和心率、利尿、白细胞计数的变化,改变osmolyte平衡,和行为变化(见部分6处理和运输)。虽然这些反应可以有短期的积极作用,也有很多是负面的,所以他们应该在可能的情况下避免。他们可以通过研究来评价提取血液(见5.9节收集的血液和其他组织)。
  • 三级压力反应与长期接触和有机体的健康产生负面影响。影响与三级压力包括减少增长,合同倾向疾病和生殖功能下降(Selye 1976;Schreck et al . 2001;Iwama et al . 2006;见章节8场适应7.3适应实验室环境)。为了避免三级压力反应的最好方法是照顾动物,减少应激反应。

4.2.2测量,避免压力

而压力的本质是阴险的,它也往往是多态,改变随着时间的推移和采取不同的形式在不同的物种在人生的不同阶段。它测量血液中激素的变化很少是可行的评估主要或次要的压力;因此,调查人员建议设计实验,避免压力,除非研究需要测量的压力指标的目的。重要指标缺乏压力坚持正常的行为活动和饲料倾向和成长。仔细的实验设计和规划可以保证研究结果不抱愧蒙羞被识别或无限的压力。除非研究的目的是建立最优条件持有特定的人工饲养的鱼类,如人工繁殖濒危物种,它通常是可取的调查人员选择物种实验的最优条件是已知的和在实验室中可以重新创建。具体考虑因素包括(1)物种的选择,(2)动物的历史研究中,水化学(3),(4)水量、水温(5),(6)光照条件和周期,(7)衬底,(8)噪声和其他物理刺激,(9)住所、放养密度(10),(11)槽相对于体型大小和活动率。其他变量,如鱼密度或坦克覆盖的存在与否,可能是重要的。物种被认为是可靠的实验室模型(例如,斑马鱼或日本青鳉),或者是常用的鱼文化(如通道鲶鱼Ictalurus蜥或虹鳟鱼雄鱼mykiss)可能被选中当这样一个选择是兼容的研究目标。

除了上述因素与长期维护相关联,当鱼处理或受到额外的考虑各种实验操作。

  • 处理应该最小化。只是抓鱼在网可以引入应激激素的释放,如皮质醇,在一分钟之内。鱼应该给时间恢复从处理前在实验中使用。所需的恢复时间可能随物种和条件;因此,初步测试将有助于建立适当的恢复期。
  • 可以减少压力的影响通过使用镇静剂或通过添加环境盐控股水减少渗透和相关的压力。(注意,海洋鱼类,由于其渗透调节的要求,可以是一个例外)。具体的盐和浓度取决于每个鱼类和环境条件。镇静剂,然而,可以唤起生理应激反应(Trushenski et al . 2012年),所以他们应该谨慎和依法建立指导方针。
  • 鱼源自的环境条件,或者,不应迅速改变。特别是温度条件。2°C的瞬时改变水温通常并不致命,但它会导致检测应激反应。可容忍的变化取决于物种生活史阶段,之前的热历史,和初始条件。由于先前的热历史影响被发现只要一个月后治疗。快速、大量的水质量的变化也应避免(见部分7水质量)。
  • 鱼的密度应适当。鱼生活在浅滩应该作为团体而不是在这样的大集团,拥挤和争夺食物和空间或降低水质。
  • 相当长的时间应该允许从干扰中恢复过来,如果兼容研究设计。至少1周的复苏是更可取的,24小时内至少应考虑即使恢复时间不是绝对清楚。虽然生理反应可能回到预应力条件更迅速,鱼可能是异常敏感,随后的干扰的时间更长。恢复正常喂养和群体性活动通常可以很好地衡量经济复苏。

作为有经验的鱼养殖者和调查人员学习,成功的至关重要的公理维护鱼类被囚禁的“了解你的鱼。“缺乏经验的调查人员建议与经验丰富的人员密切合作,直到他们获得足够的经验来理解什么是正常的鱼。读者可能会获得额外的信息关于压力和应激反应在鱼类从几个评论(Bonga 1997;巴顿2000)。

4.3痛觉过敏和痛苦

疼痛是根本上意识的心理状态。疼痛的定义所提供的国际疼痛研究协会(IASP,http://www.iasp-pain.org/)是由科学和医学社区广泛接受。疼痛是定义和描述IASP是(1)“…一个不愉快的感觉和情绪体验与实际或潜在的组织损伤相关,或描述的这样的组织损伤,”(2)“…总是主观的,”(3)“…有时没有组织损伤的报道”(IASP 2011,http://www.iasp-pain.org/Education/Content.aspx?ItemNumber=1698&navItemNumber=576疼痛)。这个科学组织解释说,疼痛的定义必须避免连接到外部诱发刺激(墙1999;IASP 2011)。科学困难出现时,定义应用于动物的心理体验的意识不能客观地分辨。科学家试图确定鱼感到疼痛就发达的代理指标,到目前为止,有缺点。总的来说,重量在鱼类研究的证据表明,哺乳动物疼痛的经历不是经验丰富的鱼类。

为了更好地理解科学的水生动物生理学的研究文章welfare-related方面,一些偏见和局限性最近阐明(增加2007;Browman和Skiftesvik 2011;玫瑰et al . 2014年)。的困惑与痛苦研究动物,包括鱼类,是由于未能区分伤害感受和心理事件,必须存在如果疼痛发生(Vierck 2006;玫瑰和伍德伯里2008)。鱼类的研究,大脑结构调节疼痛和/或缺乏意识在哺乳动物中,有一个缺乏类型的痛觉受器(玫瑰et al . 2014年)。

“伤害感受”一词指的是无意识的发现潜在的有害刺激的外围,脊椎和皮层下神经系统的水平。伤害感受是神经编码的过程有害刺激,反应,可以自主或行为(IASP 2011)。而疼痛的反应通常,但不总是,疼痛在人类之前,他们必须在大脑特定区域的意识转化为心理体验为了分类和感到疼痛。伤害感受是一种常见的,但并不是一个普遍的,然而,脊椎动物的特征。例如,板鳃类物种研究似乎缺乏疼痛的能力(Coggeshall et al . 1978;雪et al . 1993年)。

自2004年出版的指南(2004年使用鱼类研究委员会),大量的研究,主要是通过Sneddon和同事,表明痛苦经历证明了彩虹鳟鱼雄鱼mykiss(例如,却把2003;却把et al . 2003 a, 2003 b;赖利et al . 2008;总结了布雷斯韦特,2010)。主要依据他们的结论是观察鱼喂养和通风率的变化,以及“异常行为”随后麻醉和注射大量的稀醋酸或蜂毒到下巴的鳟鱼。这些实验诱导行为的挑战(到2003年上升,2007年,和玫瑰et al . 2014年)并没有复制其他调查人员(危害et al . 2005;纽比与其他鱼类和史蒂文斯2008)或测试(赖利et al . 2008年)。研究依靠端点的回避或逃避有害刺激疼痛指标(邓禄普et al . 2006;Millsopp和薄层2008)也可能是不准确的,这些行为端点不需要意识(见2007玫瑰和玫瑰et al . 2014年)。

硬骨鱼类的伤害感受的几项研究表明一些硬骨鱼类和哺乳动物之间的差异影响疼痛的感知。解剖和生理的研究已经报道的发生δ和C纤维伤害感受器传入三叉神经的虹鳟鱼(Sneddon et al . 2003 b)和尼罗罗非鱼Oreochromis niloticus尾神经(罗克et al . 2010年)。δ纤维的类型疼痛的传入负责触发迅速感觉到,距离“第一痛苦”人类,而C纤维是最丰富的一种哺乳动物的躯体感觉神经纤维和负责更多的厌恶,持续和燃烧类型的“第二痛苦”人类。尽管这些研究显示,δ型纤维相当众多,只有少量的C纤维被发现三叉神经的虹鳟鱼(Sneddon et al . 2003 b)和尼罗罗非鱼尾神经(罗克et al . 2010年)。解剖观察相对于这两个物种了布雷斯韦特(2010)声称支持的合理性硬骨鱼类的疼痛,然而C纤维禁忌的罕见的可行性pain-induced痛苦,甚至是激烈的,长期伤害感受鱼。板鳃类,特别是鲨鱼和鳐鱼,δ和C纤维被发现(Coggeshall et al . 1978;伦纳德1985;雪et al . 1993年)。软骨鱼似乎也缺乏脊髓板我,主区疼痛的传入突触的连接(卡梅隆et al . 1990年)。

其他实验和现场描述性研究禁忌的痛苦经验在某些鱼类。恢复喂养和立即发生了明显的正常活动,或在几分钟内从麻醉手术后恢复(Narnaware et al . 2000;Narnaware和彼得2001;危害et al . 2005年)。生物遥测术研究已经证实,正常行为的快速复苏发射机植入后,以及长期生存和正常行为(瓦格纳和史蒂文斯2000;纽比et al . 2007;库克et al . 2011年)。国钓鱼的研究一直显示发布后立即恢复正常活动,或者最多的相对较短的时间内释放。许多情况下的鱼被recaught已报告发布后几分钟内(希尔et al . 1986;玫瑰et al . 2014年)。 There is little debate that exposure to noxious stimuli, regardless of it being experienced as pain or not, is stressful from a behavioral standpoint; therefore, exposures to noxious stimuli should be minimized. While firm in believing that research on live fishes is acceptable and essential, the UFR Committee recognizes the sometimes difficult task facing IACUCs that must develop institutional guidelines that are both functional for, and accepted by, their constituents.

所有受试者实验过程必须免受潜在的生理或行为障碍和危害结果被接受为代表的人口的实验对象被吸引。控制和减少生理压力和接触有害刺激可降低实验动物伤害的可能性,提高数据质量通过最小化任何的压力和其他生理干扰/行为偏差,如疼痛的行为反应,一些观察人士可能会将痛苦。不利的因素鱼福利都很有效,客观的生理指标和行为健康。科学文献应该通知IACUC发展中具体的政策建议,或水生动物福利法规。

不管结论接受个人调查人员及其IACUCs有关“疼痛,”小心处理程序的重要性,包括镇静或麻醉,是强调。使用镇静剂或麻醉剂抑制鱼类通常是必要的,以防止伤害动物,特别是在侵入性程序(见7.12节手术)。镇静或麻醉也可能是重要的安全从研究者的角度,特别是当处理大或者危险的话题。程序中描述的指导方针提供额外的信息(见部分7.11限制鱼类:镇静剂和相关化学物质)

5。场活动

5.1栖息地和人口方面的考虑

鱼是否收集调查,研究在博物馆保存,或加工为渔业管理获取所需数据,调查人员应该遵守和转嫁给学生和员工严格的伦理栖息地的保护,尊重和人道对待动物的采样、处理以及安乐死(ASIH et al . 1987, 1988;BOB国际体育兽医2013)。应该在最小化的方式进行收集栖息地干扰和“过度”死亡。在这里委员会认识到,目前不存在野外采集技术,将导致人口被采样零死亡事件。研究目标通常会规定适当的抽样方法。给定一组替代抽样方法和收集齿轮,调查人员可以选择造成的栖息地干扰的最低水平和死亡率在目标和非目标鱼类种群。收集大型系列动物育种聚合应该避免,除非需要实现研究目标。使用收集技术破坏栖息地也应该避免不必要的或执行必要的最低程度上实现或抽样研究目标。例如,拖网捕鱼或其他形式的拖拖档记录鱼类多样性至关重要或监测鱼类种群的健康;然而,这样的齿轮可以导致大量干扰基质,植物,或其他重要结构元素的鱼的栖息地。 Sampling equipment and strategies can be designed to minimize incidental capture of non-target species. Collecting gears, such as gill nets deployed for nonlethal sampling, should be checked frequently to avoid unnecessary mortality. Regardless of the purpose of the experiment—whether to manipulate abundance or to study behavior, reproductive potential, or survivability—mortalities within the population and disturbance to habitat should be kept to the minimum amount that the investigator (along with the IACUC) determines to be acceptable.

读者应该注意到,一些内容在第五节并不局限于领域活动但也可以扩展到实验室的情况。

5.2字段集合

5.2.1许可

研究鱼类经常需要捕捉野生标本,无论是实地研究数据记录、标记和调动或活禽或保存标本的实验室研究。除了收集公海中(不是任何特定国家的管辖海域),收集鱼类的研究目的需要科学收集器的许可证。许可证签发自然资源机构,省、联邦、和部落实体在美国和加拿大(参见3.4节许可和证书)。允许应用程序通常要求的信息进行研究,取样方法、取样,和数量和处置鱼标本收集。清单的国家允许机构在美国,以及其他有用的信息关于鱼类的集合,看到沃尔什和tommeador一路(1998)。收集鱼类的联邦土地通常需要一个单独的特殊用途许可证获得的机构负责管理。地方、州和联邦政府,和部落政府发放收集许可证通常要求收藏者通知他们具体的地点,日期,并提出抽样的方法。收集鱼类由联邦人员私人土地需要一个许可证批准访问的地主。

5.2.2自然历史集合

5.2.3代表性样本

一般来说,正在研究的问题和研究设计本身决定所需的样本数量的调查。获取鱼类的研究通常涉及到在一个很小的一部分人口或社区出现在一个位置。的一般原则应用当抽样鱼类是最少的动物必须可靠地解决假设(见2.3节统计设计)。所需的最小数量的鱼类提供健壮的统计结果应通知采样协议。根据装置和方法,所需的处理,可能会导致高死亡率。特别是在调查涉及鱼卵和生命早期阶段。然而,高水平的青少年从人口减少死亡率和快速复苏都是很多鱼类物种的生活史特征事件。

抽样利用视觉调查本身并不总是足够的。这是在结构和生物复杂的栖息地,鱼类生物多样性数据的保护和管理是必要的。小,神秘的鱼在珊瑚礁栖息地,例如,是最好的收集利用小规模抽样ichthyocides;收集百分比增加视觉检测鱼发生与ichthyocide应用程序(Smith-Vaniz et al . 2006;Ackerman和Bellwod (2000)。最常用的ichthyocide鱼藤酮(见部分8.1安乐死),一种天然的酮从豆科植物原产于东南亚和南美。这种化学物质的使用选择多样化(McClay 2000);它的使用与超级跑车的威胁表示(雷纳和短剑2006)。罗伯逊和Smith-Vaniz(2008)回顾了鱼藤酮使用的本土生存渔民渔业管理人员,以及它的毒性和对其他生物的影响。鱼藤酮麻醉和分派鱼类通过阻断细胞吸收的氧气(歌手和拉姆齐1994)。手动和SOP (http://BOB国际体育www.aka-wood.com/shop/55061p)详细的正确使用鱼藤酮(Finlayson et al . 2000;Finlayson et al . 2010年),和大量的培训课程是提供给渔业生物学家和公共机构。Finlayson et al。(2010)建议谨慎使用鱼藤酮作为最后的手段,由于潜在危害意想不到的目标。调查方法(2011年标志)是审慎的,是分类技术的可用性(沃尔什和tommeador一路1998)确认物种存在(见部分8.1安乐死)。

抽样鱼在污染物的研究往往是固有的生物监测的水生生态系统,因为鱼积累环境污染物的能力和生理反应。化学污染物现场抽样程序鱼(休斯et al . 2006;施密特et al . 1999年)是有用的,据研究协议选择端点。一套文档和数据库都可以从美国地质调查局的生物监测的环境状况和趋势(最好的)项目(http://pubs.er.usgs.gov/publication/itr19990007)和国家污染物生物监测计划(http://www.cerc.usgs.gov/data/ncbp/ncbp.html

5.2.4濒危物种的集合

“濒危物种”一词不仅适用于物种正式列为威胁或濒危物种由州或联邦机构也已被确认为候选人这样的清单。濒危物种的数量、威胁和脆弱的鱼类在美国南部1969年和1989年之间增加了125%(沃伦et al . 2000年)。调查人员需要注意的一个水生栖息地取样是否支持濒危物种,以及如何识别这些物种在该领域(Warren和毛刺1994)。调查人员还可以决定是否支持濒危和nonimperiled物种的栖息地是保护关心的领域,如果物种保护关心的重点(Jenkins et al . 2011年)。国家野生动物行动计划(2007年鱼类和野生动物机构协会,http://www.teaming.com/state-wildlife-action-plans-swaps)和美国自然遗产项目的网络(http://www.natureserve.org/natureserve-network)维持上市的鱼(和其他动物和植物物种)的保护问题。国家物种列表可以获得从办公室问题收集网站的许可和NatureServe(最初被称为生物多样性的联系信息,http://www.natureserve.org/visitLocal/index.jsp)和物。物保护濒危物种计划(http://www.fws.gov/endangered/)维护联邦保护物种的列表。联邦政府威胁濒危鱼类的列表也可以搜索网站的国家海洋和大气管理局(NOAA,http://www.noaa.gov/)渔BOB国际体育业服务(http://www.nmfs.noaa.gov/)办公室的受保护的资源(http://www.nmfs.noaa.gov/pr/)网站或NatureServe (http://www.natureserve.org/)。公报强调保护海洋或溯河产卵的鱼类(http://www.nmfs.noaa.gov/pr/species/fish/从国家海洋和大气局渔业服务)也可以。BOB国际体育列表的保护鱼类在加拿大、墨西哥和其他国家可以在网上查看各自的国家的网站(如物种风险行为公共注册中心,http://www.sararegistry.gc.ca/default_e.cfm加拿大野生动物服务),以及通过“外来物种”报告物保护濒危物种项目网站(http://ecos.fws.gov/tess_public/SpeciesReport.do?lead=10&listingType=L)。国际自然和自然资源保护联盟(IUCN)维护世界自然保护联盟濒危物种红色名录TM,版本2013.1 (http://www.iucnredlist.org/),提供覆盖全球的淡水和海洋鱼类的保护状况,以及其他植物和动物。

濒危物种的集合是只允许在特殊情况下(如保护现状调查)和需要特别许可证。唯一的处理技术(处理,结果没有任何伤害动物)使用。例子可以包括血液和精液收集,和某些鳍剪裁和标记方法。如果这项研究的目标是收集的濒危物种研究生活,或者偶然捕获预期所捕获,那么任何集合的方法可能是有害的(例如,刺网捕捞没有密切监测)或致命的(例如,ichthyocides)应该被避免。

保护濒危鱼类的行动经常涉及易位,在自然的地方或从自然传播设施然后回归自然。濒危鱼类的环境法律易位是复杂的,基于资源使用等事项,适用性和移植安全网站,移植的个人网站中(即是否合适。足够数量或免于疾病;Minckley 1995)。所有易位的努力必须由该机构的权力和责任种类和地区问题,不应该试图未经授权的个人。

5.2.5博物馆标本和其他保存标本

鱼类自然种群对博物馆的收藏保存至关重要(1)理解基本的生物学和生活史,(2)记录和记录生物多样性,和(3)建立参考集合对于理解进化关系和环境影响(1988年ASIH et al . 1987年)。研究生态系统变化或描述新物种经常需要相对较大的系列的集合(足够的计算统计计数和测量)从多个种群地理分布范围(休斯和麦考密克2006)。抽样自然鱼类种群为这些目的通常涉及广泛的调查和收集的标本在自然种群发生比例;此外,抽样不得假说驱动的。分子系统学的研究通常涉及很小数量的标本,或少量的组织从研究鱼类。然而,同样重要的是在这些研究一般生态调查存款凭证标本在自然历史博物馆,样品在哪里保持冷冻或保存在固定剂,如95%酒精或70%乙醇(异丙醇),以供将来参考(惠勒2003)。博物馆的收藏的鱼类也可以用于其他类型的研究。两个重要的原则应遵循在收集鱼类博物馆保存(1)标本收集的数量应该是最低必要实现研究目标,和(2)动物应该成为收集各种各样的研究。包含特定字段数据的精确的符号(如日期、具体位置、栖息地类型等等)应该伴随每个集合。

标本收集应保存在博物馆沉积的方式最大化的效用研究和最小化需要额外的收集。福尔马林固定的标准做法用于确保长期保存鱼标本的质量。档案存储的首选方法是直接浸泡在10%的福尔马林(甲醛3.7%)解决方案,随后转移到酒精(70%乙醇,un-denatured首选)长期保存和储存,与凭证标本。化学物质经常被添加到福尔马林缓冲溶液或保留颜色(例如,Ionol)(芬克et al . 1979年)。虽然福尔马林固定剂的选择对脊椎动物组织,其他固定液有时用于专业研究目的等组织学(Bouin或Gilson液)和电子显微镜(戊二醛)(卢娜1992,1992;Presnell et al . 1997;克拉克1981)。这些方法通常涉及小块固定的组织解剖标本可能通过牺牲其他比浸泡在福尔马林。尸体的长期存档凭证标本应在福尔马林固定,后来转移到酒精。安乐死鱼浸泡在福尔马林应该练习之前,提供镇静不引起有害影响研究的目标。 A variety of chemicals, such as tricaine methanesulfonate (MS-222), may be used to anesthetize or euthanize fishes (see section 7.11 Restraint of Fishes: Sedatives and Related Chemicals). When study interests demand that specimens be fixed without prior treatment with sedatives, the specimens can be numbed in ice water, or for small fishes, immersed directly in liquid nitrogen (see section 8.1 Euthanasia).

部分动物的标本,包括精子、卵子、胚胎,组织和血清,有时组织倾斜。例如,国家动物种质资源计划(http://nrrc.ars.usda.gov/A-GRIN/main_webpage/ars?record_source=US)获得和保护遗传资源保护生物多样性的人口调整或基因组研究。圣地亚哥动物园保护研究所(http://www.sandiegozooglobal.org/ICR/purpose)使用遗传资源存储在多个技术。各种迭代样本银行进行了回顾性的分析发生在全球众多的调查,包括环境监测、遗传学研究和系统误差。鱼类组织(肝脏和肌肉)已经收集了各种环境的长期储存标本的国家标准与技术研究所(NIST,http://www.nist.gov/index.html)通过生物监测标本国民银行(明智的和科斯特1995;贝克尔和明智的2006)。

5.3现场捕获技术和设备

抽样方法的选择应由工人安全,研究目标、季节性因素,和栖息地类型抽样。捕捉技巧应该避免或减少伤害和压力压力(见4.2节)(McMichael et al . 1998;亨利和灰色2003;亨利et al . 2003年)。住井或坦克应提供如果鱼要保持超过所需的时间来收集必要的指标。应该小心避免意外捕获不属预定目标的物种并确保释放顺便收集个人极少或完全没有伤害(1988年ASIH et al . 1987年)。物种可能是危险的工人由于大小或species-characteristic行为或功能需要额外的预防措施(见章节5.5危险的物种和标本7.10危险的物种和标本被囚禁)。

几个研究表明electrofishing是最有效的技术获取鱼在淡水栖息地组合数据(尤德史密斯,1998)。Electrofishing可以由涉水或boat-mounted方法方法。适当electrofishing协议应考虑采样目的和物理约束的环境(如电导率、水深和障碍物的存在),以及使用装备和技术,减少潜在electrofishing伤害鱼类(施耐德2003;院长和寺庙2011)。选择抽样方法,比如盛,吉尔或鸟网,拖网,撒网,解除或推网、刚性陷阱(例如,小鱼陷阱,板条陷阱),环网、长袋网网、堰,或钓鱼,也同样有害鱼类如果不能正常进行。抽样方法选择应该允许有效的捕获鱼的种类和大小需要解决的研究目标同时最小化伤害和收集鱼类的死亡率和非目标生物。可能需要多个采样齿轮广泛的收集的鱼大小或物种或者不同的栖息地。被动的获取方法,如设置网和陷阱,应经常检查以防止不必要的目标和非目标物种的死亡率。网和陷阱应该仔细定位、锚定标记然后删除在停止取样,以避免“幽灵钓鱼”(丢失或被遗弃的渔具,继续杀死鱼类和其他海洋生物)。来临et al。(2009)和来自海洋的et al。(2013)提供额外的信息关于标准的抽样方法对鱼在淡水环境中,以及各种采集齿轮的效率和特异性。

5.4现场限制鱼类:镇静剂

长时间的限制,导致生理应激应该避免。在某些情况下,使用镇静或麻醉代理来减少压力可能是明智的。虽然术语“麻醉”、“镇静”,和“固定”在指鱼类交替使用,这句话有不同的定义反映出不同层次的感知和响应性。罗斯和罗斯(2008)有麻醉的定义为“一个可逆,广义的感官知觉伴随着药物引起的类似睡眠的状态,或通过物理手段”和镇静”初步的麻醉水平,刺激反应大大降低和一些镇痛,但感官能力通常是完整和平衡不发生损失。”“固定”一般指预防运动,并不意味着任何状态的敏锐感知。根据化学剂及其作用方式鱼,可以申请一个或多个条款。作为一个保守的方法,此处使用的术语“镇静剂”,这个词可能是适用于大多数的代理用于抑制和促进鱼类的处理。

5.4.1之前药物批准用于鱼

AFS, AADAP项目,FDA兽医中心参与正在进行的对话,以确保渔业专业人士访问最新的和准确的信息关于鱼的使用药物(出版和Trushenski 2013)。BOB国际体育字段的唯一物质FDA批准的镇静的鱼是ms - 222。该产品是目前在美国和包含Tricaine-S™(西方化学有限公司;身孕,华盛顿)。然而,使用ms - 222字段是有限的,因为FDA要求食物的鱼,包括野生鱼被捕获并被人类吃掉,必须经过21天的撤军时间发布前或屠宰供人类消费(安德森et al . 1997;Trushenski et al . 2012 a, 2012 b)。使用ms - 222是进一步限制ictalurids,大马哈鱼,esocids, percids或其他实验室或孵化器鱼类举行水温大于10°C。处理的干燥形式化学时,个人防护设备,如呼吸面具和手套应该使用。看到Coyle et al . 2004麻醉使用水生动物在南方地区水产养殖中心简报3900年https://srac.tamu.edu/index.cfm/event/getFactSheet/whichfactsheet/162/。与许多治疗药物,这些镇静剂不能为头孢菌素的使用(即规定。、其他类群或治疗方案不写在标签)。添加一个适当的缓冲化合物,如碳酸钠、ms - 222推荐当用于“软”水来抵消其酸化效果,从而增加后处理生存(Smit et al . 1979年)。

5.4.2监管低优先级(含)的药物

虽然二氧化碳(有限公司2)不是FDA批准的药物用在鱼,它被认为是一种药物,部队可以用作鱼镇静剂提供某些条件得到满足(FDA 2011;看到附录表1的含碘药物使用和注意事项)。更具体地说,如果一个适当等级的有限公司2使用,良好的管理实践,和当地环境的需求得到满足,FDA已确定,对使用公司的监管行动吗2作为一个鱼镇静剂是不可能的。

5.4.3临床实验的新动物药物(INAD)

两个目前未经批准的药物,benzocaine-based产品(Benzoak 20%苯坐卡因;由ACD制药,奥勒松、挪威)和eugenol-based产品(AQUI-S20E 10%丁香酚;由AQUIS新西兰有限公司下赫特,新西兰)可能最初2015年FDA批准用于稳重长须鲸和可能被用作镇静剂INAD免税的授权下获得FDA和持有的物。目前,eugenol-based产品可以作为速释领域应用镇静剂,鱼很可能将镇静一生中只有一次。所有其他应用程序需要为期3天的戒断期。AADAP研究计划(http://www.fws.gov/BOB国际体育fisheries/aadap/research%20program%20-%20history.htm)负责物INAD计划(http://www.fws.gov/BOB国际体育fisheries/aadap/national.htm),包括监管和研究水产养殖用药。更新水产养殖药品被发现通过INAD计划的网站。

使用镇静剂,少量的鱼应该容许范围内测试,以确定一个合适的剂量,并确保该物种将恢复正常生理和行为状态在一个可接受的恢复时间。动物必须保持观察,直到适当的复苏出现(见部分4.2.2测量,避免压力)。使用镇静剂必须经过处理按照当地、州、部落、省级和联邦法规(见也5.7临时设施和维护7.11限制鱼类:镇静剂和相关的化学物质)。

5.5危险的物种和标本

物种对人类构成威胁的是最经常遇到在野外条件下,但是实验室的指导方针是相似的情况。危险的物种应该处理的方式是安全的调查员和动物被处理。调查人员应认识到安全法规的机构关于危险或有毒的动物的使用。这些规定可能包括安抚,限制只有经过授权的人员,指定使用防护服或处理设备,和决定治疗个人受伤的动物,包括获取后续医疗急救和程序。特殊处理方法将取决于物种被处理,危险调查员的性质,研究工作的性质。一般的指导方针:

  • 程序应该减少所需处理时间,减少或消除处理程序和动物之间的联系。
  • 研究者不应该独自工作。一个人,也在捕捉和处理技术,知识渊博的和紧急措施,应该出席。
  • 防止严重继发感染,调查员应小心避免常见的咬伤,擦伤和磨损,削减和脊椎穿刺,所有这些会导致感染。
  • 人类的伤口处理不当造成的海洋和淡水动物应尽快清洗,避免细菌感染(即。人畜共患病)。任何需要控制出血。
  • 伤口应该与至少一公升灌溉可用的淡水清洁消毒。在缺乏无菌生理盐水或无菌水、自来水或瓶装饮用水可以使用,而要避免海水。
  • 应用常规急救后,应寻求医疗援助,防止并发症。

总的来说,咨询的相关文献和他的同事们经验丰富的物种是最重要的。一般和特定信息,特殊的海洋环境,几本书是可用的,主要是写作为潜水员的急救指南,自由潜水者,常去经常接触海洋动物(Halstead 1995;坎宁安和Goetz 1996;Auerback 1997),就像潜水员警报信息网络(丹)网站(www.diversalertnetwork.org)。

5.6处理和运输

鱼会表现出一定程度的应激反应时处理和运输。的方法处理鱼随物种,它们被发现的环境,一个特定的地区或国家的传统和资源(Avault 1996)。可以减少应激反应,然而,通过消除粗糙处理,快速的温度变化,突如其来的水质变化,过度磨损,严格限制。不恰当的处理和运输过程可以导致血液变化概况(Ellsaesser和Clem 1986)和大量的死亡率(Weirich 1997;卡迈克尔et al . 2001年)。处理和传输程序必须设计压力的影响降到最低,从而减少直接和延迟的损失(见部分4.2压力)。

一些生理变化发生在响应处理和交通压力是可衡量的,可以监控。这些变化包括增加心输出量,增加了吉尔多血管,释放儿茶酚胺和皮质类固醇激素(卡迈克尔et al . 1984;Weirich 1997)。处理领域鱼类或在实验室经常以增加对疾病的易感性认为是由免疫介导的抑制(Wedemeyer 1970)。淋巴细胞减少、嗜中性和淋巴细胞停止响应表示结果的处理和运输压力(1986年Ellsaesser和Clem)。临床血液学的值可用于一些物种(Stoskopf 1993 b)。根据压力的严重性和曝光时间,死亡率会从渗透调节的功能障碍和免疫抑制。

减轻压力与处理和运输有关,研究者可以减少的数量和严重程度的压力,减少压力的持续时间,减少代谢率的增加。收获技术和出货前治疗是重要的成功的活鱼运输(杜普里和匈奴人1984)。预处理治疗包括镇静剂降低代谢率,或钙盐或运输水以防止或减少渗透调节的功能障碍,导致离子失衡(卡迈克尔et al . 1984 b)。饲料应保留前1 - 2天运输(Weirich 1997)。一般来说,传输对动物的危害较小,如果在凉爽的天气里完成的。应该使用适当的运输设备。运输坦克应该建造和使用前应消毒(Avault 1996)。鱼的重量可以在live-hauling车辆运输安全取决于曝气系统的效率,运输的时间,水温、鱼的大小,和鱼类(Avault 1996)。维护可接受的范围内的溶解氧、二氧化碳、温度、氨、和pH值在运输是至关重要的。鱼可以捕获和运输单元之间传输,或运输单位和单位之间,湿或干传输方法。 Wet transfer involves transport of fishes in a container of water and minimizes direct contact with nets. Wet transfer usually results in less stress than dry transfer, where the net is used alone. Ideally, fishes should be allowed to recover in the same or similar medium used for transport (Carmichael et al. 1984b; Weirich 1997). The length of time for recovery may vary depending upon conditions, the amount of handling, and research objectives, but 72 hours typically is considered a minimum following extensive handling (see section5.8现场适应)。

5.7临时设施和维护

因为每个水生物种的生物需求和单个项目的性质不同,只有最一般建议提供临时保持和维护。测试和比较几种方法的住房可能是必要的为了找到最适合的需求种类和目的(s)的研究。易于维护的动物饲养员,虽然重要,但不应该是住房条件的主要决定因素;然而,这样缓解通常确保更符合建立维修协议(1988年ASIH et al . 1987年)。

正常现场维修设备应该包含那些方面的自然栖息地被视为重要的动物的生存和福祉。充足的维修设施可以通过观察动物体重增长和变化,监测存活率,活动水平,一般的行为,和外观(Snieszko 1974)。应提供营养均衡的饮食,或者天然食品应尽可能复制。应遵循自然光线和温度条件,除非改变这些因素正在调查中实现预期效果(例如,产卵周期操作)(1988年ASIH et al . 1987年)。鱼类有最佳热政权(西尔维斯特1970),和免疫系统功能最好的这样的范围内(1992年布莱和Clem)。疾病发生在温度窗口,如爱德华菌属ictaluri在频道鲶鱼(霍克1979)。油舱清洗的频率应该代表一个折中清洁水平的必要预防疾病和压力由频繁处理(1988年ASIH et al . 1987年)。

文化、诱饵或钓鱼运动用鱼类物种,鱼类一般都在大桶或坦克在装船前举行。这种持有使生产者根据大小和管理级鱼在必要时药物疗法。控股也适应处理和运输的鱼(匈牙利语et al . 1984年)。当通道鲶鱼是从一个池塘,生活汽车或鱼袋用于工业(匈牙利语et al . 1984;绿色和纹身被2011),可以加上收获塞纳河作为临时容器和年级的。这些方法通常适用于所有pond-reared物种。在池塘控股情况下,鱼类可能会搬到更深的水的情况下,使用再循环泵或中控室内可以是有益的。

与其它控制系统的贮槽需要允许放养密度或鱼类生物量的关系可用水量。必须考虑水流入和周转率因为充足的水交流需要良好的水质。氧气在传入的水需要超过鱼类代谢耗氧量的坦克(Casebolt et al . 1998年)。充分曝气可以提供压缩空气,注入或瓶装氧气,或搅拌。镇静剂也可以用来减少鱼类的体育活动,如果符合研究目标。多余的噪声和振动应避免,因为这些因素会产生急性或慢性应激反应在鱼类(Stoskopf 1992)(见7.4节鱼类的长期住房设施)。

如果极端天气和环境事件发生时,应急准备措施可能是必要的对于未来短期维护动物的研究。例如,饲料存储过剩,替代水的供应,和备用发电机可能需要。积极的机构和人员计划可能实际甚至IACUCs要求。

5.8现场适应

因为许多生理过程可以改变处理和传输鱼类,新环境适应或调节鱼他们减少潜在的负面影响。如果供水的物理和化学性质的临时设施(见5.7节)临时设施和维护不同的源水,应该小心提供水尽可能相似。例如,鱼漂浮的塑料袋的大气氧气在水可用于允许捕获的鱼适应新的水温。如果差异更大,逐渐取代了水在运输单位的源水控股单位是一种常见的实践,为鱼类提供足够的时间适应。有用的笔记总结了如何运输和适应生活的海水鱼类在南部地区水产养殖中心的海水鱼的运输情况说明加载率和技巧的物种(詹森1990,https://srac.tamu.edu/index.cfm/event/getFactSheet/whichfactsheet/77/),设备和指导方针(魏恩Wurts 2011https://srac.tamu.edu/index.cfm/event/getFactSheet/whichfactsheet/74/Jensen)和过程和加载率(1990 b),https://srac.tamu.edu/index.cfm/event/getFactSheet/whichfactsheet/76/),以及在北方地区水产养殖中心字幕新闻中心,运输鱼袋(1993年斯万,http://www.ncrac.org/oldfiles/nr/rdonlyres/237dfd95 - 2967 - 4455 - a668 cfa051036be/0/ncrac104.pdf——3)。

5.9收集的血液和其他组织

结果仔细的收集和检查的血液和其他组织往往至关重要研究鱼类(Blaxhall 1972;本厂1992年)。无菌条件这些程序往往无法提供在现场条件下,必须注意防止受伤和压力的动物。的血液和体液样本可以从鱼类的前提下获得生存,甚至小试样在100克(Stoskopf 1993 a)。含有少量的塑料注射器抗凝或铵肝素钠或柠檬酸钠等建议,以防止血液凝结。研究目标将决定适当的类型的选择,体积,和抗凝剂的浓度,如果需要的话。三个主要技术设计收集血液从鱼类:心脏穿刺,静脉穿刺和尾出血(Blaxhall 1972;Stoskopf 1993 a, b)。尾巴取血样的首选地点。船舶运行的椎骨下鱼可以通过使用横向或腹侧采样方法。心脏穿刺从腹侧有时被用于梭状回鱼或通过鳃盖的横向压缩的物种。 For repeated sampling, cannulae may be implanted in the dorsal aorta through the buccal cavity. Blood from the caudal vessels may be collected directly into collection tubes by cutting off the tails of sedated fish that will be euthanized following the procedure. However, extraneous fluids and proteins that may influence cell quality often co-occur with this procedure. Caution must be exercised to ensure that the method of sedation will not interfere with subsequent analyses. Additional information on sampling methods for the collection of blood from fishes has been described by Klontz and Smith (1968), Smith et al. (1999), and Marino et al. (2001).

托收是有用的其他组织包括耳石、鳃、肾、甲状腺、脾、睾丸、卵巢、肝脏、心脏、大脑和肌肉。收集内部组织通常需要牺牲的动物主题之前,必须适当的麻醉或安乐死(见部分8.1安乐死)。这些组织还可以用于分析(见部分污染物等目的5.2.3代表性样本),或活组织检查或验尸。组织可以使用新鲜的或冷冻,或放置在一个固定或保存介质如缓冲福尔马林、乙醇或甲醇,然后组织学处理(卢娜1992;Presnell et al . 1997年)。一些研究的目的可能是由鳞片的集合,刺,或小块的鳍,可以实现以最小的影响活鱼,可能被视为非侵入性抽样。这是很重要的在处理濒危物种和种群较小(见部分5.2.4濒危物种的集合)。

当运输活组织中必须有适当的离子和渗透压浓度和可能包含糖作为能量来源。有经验的调查人员发现汉克的平衡盐溶液(Jenkins et al . 2013),厄尔的平衡盐溶液,或者Holtfreter的解决方案是有效的传输媒体(Holtfreter 1931)。Noncytotoxic抗生素或抗真菌的药物可能包括防止细菌和真菌生长的有机体(Jenkins 2011;詹金斯et al . 2013年)。某些细胞和核酸稳定剂可以使鱼可能从远程位置后组织的抽样分析在实验室(Olivier和詹金斯出版社)。

6。标志和标签

6.1一般原则

标记和标志着动物获取信息的行为,研究了种群动态、与生态,所有这些都为发展中保护和管理策略是必不可少的。识别鱼类利用天然或人工标记或标志通常是需要研究年龄和增长,死亡率(包括自然和fishing-induced死亡率),丰富,琵琶鱼捕捉或收获率,栖息地的使用和运动/迁移,股票识别,或长袜成功(松et al ., 2012)。调查人员可以使用内在和外在标识系统,允许研究的性质来决定使用的类型的标签或标记。综合使用一个以上的标签或标记技术有助于确保鱼识别和标记有助于估计损失率。

基本考虑选择一个特定类型的标签或标记的背景下研究目标包括潜在影响动物生存,行为,和增长;永久标记和识别;数量和大小的动物;压力的捕获、处理和标记;总成本;标志着鱼的复苏;和任何要求之间的协调机构、州、省或国家(松et al . 2012年)。调查人员还应确定动物将风险大于正常捕食,如果它作为伴侣的愿望将减少,如果感染的风险大大增加,以及其他潜在影响(1988年ASIH et al . 1987年)。因为技术标记和标记鱼类已经广泛地查阅和不断发展,文学评论应该通知研究员(麦克法兰et al . 1990;帕克et al . 1990; Nielsen 1992; Hammerschlag et al. 2011; Wagner et al. 2011; McKenzie et al. 2012; Pine et al. 2012).

标记对鱼类的影响取决于鱼的身体状况时释放。出现受伤的物种和特定的大小,和较小的鱼类可能更敏感。小伤口引起的大多数标记和标记过程通常愈合满意没有使用抗生素进行治疗。必须使用镇静剂或抗生素管理方式符合监管要求。

6.2外部标签和标志

使用外部标签和标志已经在很长一段时间(麦克法兰et al . 1990年)。自然的标志和人工标记或标志都是常用的在渔业的研究中,每种类型提供不同的功能,以及局限性。BOB国际体育自然,外部标志包括对称的特点、色素沉着、地貌形态示量的措施,和规模特征,但是自然是受到环境和遗传的影响。鱼鳞的形状和大小,以及环间距,是经常使用的。自然的有效使用是需要了解在鱼类生活史。

多个方法可用于生成人工鱼外部标志。变更的鳍或其他身体部位,实际上100多年,可以通过冲压剪切或洞。鳍剪切或删除的选择取决于物种正在研究;例如,剪裁的臀鳍poeciliid将是不恰当的,因为它作为交配的雄性器官,但去除脂鳍的salmonid会影响可以忽略不计(1988年ASIH et al . 1987年)(见部分5.2.4濒危物种的集合)。热的或冷的品牌,标志的过程中通过将一个设备(如液氮品牌)对身体几秒钟,可能是一个有效的标记技术在特定情况下,不会造成实质性伤害底层鱼组织(科比et al . 1990年)。鱼应该麻醉前品牌。外部着色剂标记鱼类包括染料、污渍、油墨、油漆、液体乳胶,可见植入弹性体,由浸和塑料,喷涂、注塑或纹身。护理需要区分外部着色剂是相似的音调(柯蒂斯2006)。

外部标签是显眼的颜色,形状,大小,或附件的位置,是由各种材料。打印在外部标签可以传递重要数据,如个体鱼识别代码,奖励价值捕获和标签返回,和研究员的联系信息。为水轮机设计生存的研究中,通过一个外部发射机模制的鱼表明效用(邓et al . 2012;布朗et al . 2013年)。外部标签通常应用于鱼类包括飞镖nd丁字架锚标签,光盘标签,卡林标签,和意大利面或循环标记(家伙et al . 1996)。飞镖和锚定标记是最常用的外部标记(尼尔森1992年),但高损失率一直在报道一些物种(人et al . 1996年)。适当的插入技术和使用小标签相对于大小可以减少潜在的鱼伤害和标记损失(家伙et al . 1996)。

6.3内部标签和标志,生物遥测术

植入编码线标记,广播和声学遥测发射机,档案biologgers,被动综合应答器(坑)标签,可见植入α数字标记,耳石标志,和自然寄生虫内部标记系统用于识别鱼(普伦蒂斯et al . 1990;布朗et al . 2011年)。使用编码线标签识别系统已经测试管理和研究应用与多个属鱼类(巴克利和布兰肯希普1990)包括少年大马哈鱼(利特克et al . 2012年),和组织不良反应没有发生。编码线标记通常是注入软骨、结缔组织、肌肉和电子检测后手持设备。

坑标签由一个小型电脑芯片和天线封装在一个玻璃管注入鱼的肌肉组织或腹腔。每个坑标签带有独特的代码传递给手持或固定阅读设备标签范围内。坑的优点标签通常包括一个长寿命和高保留率(弗里兰1995;家伙et al . 1996);然而,体内标记位置和鱼的长度会影响保留率(家伙et al . 1996;粗鲁的et al . 2011年)。坑标签数据可以通读软、硬鱼组织;在海水和淡水;通过玻璃、塑料和金属容器;当鱼在某种速度移动。 Above certain fish size thresholds (Tatara 2009), they have little or no effect on fish growth, survival, or behavior (Prentice et al. 1990). Various tags and methods are available for the PIT tagging procedures; information can be found at state websites (e.g., Idaho and Arizona) and at manufacturer websites.

可见植入标签是字母数字混合编码和聚酯薄膜制成的。皮下注射插入透明的组织,所以他们保持外部可见(山楂et al . 1990年)。常见的标签位置包括透明组织后,下颌,或鳍膜。标签保留因物种而异,标签位置体内,和鱼大小;非常小的鱼可能不够透明的组织,以适应标签的大小(2002年Griffiths)。

操作环境温度、摄食率、光周期、外部化学浴,或标记提要可以在鱼耳石诱导特定的标志。鱼类在受控条件下传播非常适合这样的操作。耳石微观结构特性和诱导标志是永久性的,可以查看和分析在任何年龄的鱼。四环素和其他荧光化合物(如钙黄绿素、茜素化合物)钙化结构鱼类是众所周知的标记(家伙et al . 1996;卡蒂,2013年出版),尽管这样的应用程序是由美国食品及药物管理局监管的药物治疗(见部分5.4.1之前药物批准用于鱼)。鱼大小、化合物剂量和吸收方法,和水化学可以影响成功与荧光标记化合物(贝克曼et al . 1990;卢瑟福et al . 2002年)。标志着成功是最高的在鱼的时候增长迅速(科诺菲尔和希恩1999)。耳石和其他钙化结构也可以标记与碱土金属和稀土元素(behren山田和穆里根1990年)或isotopically标记化合物(Munro et al . 2008;史密斯和Whitledge 2011)。注入的妊娠女性与特定元素或化合物纯度稳定同位素可用于“大规模马克”胚胎耳石的后代(Thorrold et al . 2006年)。BOB国际体育渔业要求股票的定义和评估袜成功或传播的早期阶段适合otolith-marking技术。

几个分类群的鱼寄生虫被用作生物标记,这方法是最适合的分离相对独立的股票的鱼类(MacKenzie 1983)。复苏的内部寄生虫用作生物标记是增强如果寄生虫与特定解剖部位的鱼。决定使用一种寄生虫作为自然马克鱼是由计算发病率,寄生在一个鱼的比例人口的发病率在另一个(Wydoski和金刚砂1983)。

水下生物遥测术包括附加的设备继电器通过超声生物信息或从鱼到远程无线电信号接收系统(库克et al . 2012年)。无线电传输只能在淡水中实际在较浅深度(1988年ASIH et al . 1987年)。选择一个标签或发射机和附件或植入的方法和网站是适合鱼的种类和大小,由受过训练的人员。手术植入发射器进入体腔和自由放养鱼类。使用最小和最轻的发射机提供所需的信号类型、强度、标签和电池寿命将减少损失和潜在影响的发射机附件鱼类生存,发展,和行为。瓦格纳et al。(2011)和马尔卡希(2003、2013)回顾了手术植入发射器在鱼的技术。外部,浮力发射器与少年大马哈鱼turbine-passage研究开发水电设施(邓et al . 2012年)。与鱼暴露于压力快速变化,外部发射机可能会减少受伤或死亡的可能性比外科手术植入发射器(布朗et al . 2013年)。应该使用技术来减少皮肤刺激后外部发射机(骗子2004)(见附件部分7.12手术)。

6.4遗传标记

技术的发展,采用基于染色体和核DNA多态性标记快速和持续发展。好处使用DNA标记出现在选择育种程序,在评估的贡献和影响了物种,和描述特定栖息地要求hatchery-produced鱼(Purdom 1993)。管理自然种群,知道鱼类存在作为一个单一基因单元或相对遗传学上截然不同的族群(2003年博蒙特和Hoare)是至关重要的。遗传标记已经有效甚至在人口众多的广泛而无法哺乳动物如鲸类(Palsbøll et al . 1997年)。“DNA条码技术”有用的物种鉴定和准确地标记海鲜产品(方便et al . 2011年)。额外激励遗传标记的使用,可以获得足够的组织样本不致命的(例如,鳍剪裁)和以最小的处理。遗传标记是永久性的,存在于所有个体,因此传统标记代表一个好的选择。

前鉴别鱼类种群的DNA技术的发展,研究者研究了allozymes-variant酶编码的形式不同的同一位点等位基因或DNA序列。这种类型的遗传分析有时需要牺牲鱼获得合适的样品,和核型分析、细胞分裂的考试是必需的。小日本青鳉和斑马鱼等实验室鱼类广泛使用模型在脊椎动物发育遗传学的研究和转基因调查(Ozato和若松1994)。DNA标记的使用鱼群识别最初仅限于线粒体DNA的差异(菲利普斯和Ihssen 1990)。

DNA水平上的遗传变异可以以多种方式(博蒙特和霍尔2003)。一些包括DNA长度和序列变化,DNA片段大小变化等技术限制片段长度多态性(rflp),与线粒体DNA rflp,可变数目串联重复序列(VNTR)(微卫星),DNA指纹分析使用限制性内切酶,随机扩增多态性DNA (RAPD)和扩增片段长度多态性(妊娠)。下一代测序技术快速获取短DNA序列在成千上万的位点,为聚会提供深度的潜在基因信息(四旬斋2008)。

进一步,遗传标记可以用来解决进化问题,人口,和行为(Palsbøll et al . 1997),除了监控性能特征,如长期的繁殖成功率和栖息地恢复和保护工作的影响。BOB国际体育渔业科学家处理这些问题需要适当的更新他们的知识,科学地接受基因识别系统的潜在应用(林肯1994;Hallerman Poompuang, 1997)。

6.5稳定同位素

稳定的非放射性的同位素,天然形式的化学元素,不会自发衰变,一般稳定。稳定同位素的化学元素质量各不相同,但都具有相同的化学性质。与放射性同位素,严格监管,稳定同位素的使用不需要特别批准的设施和许可。同位素分馏自然系统的研究了多年,现在和稳定同位素比率相对频率用于鱼标记。稳定同位素可以通知研究营养食物网结构、饲料效率、鱼迁移和起源的地方,污染物在生物和其他生理和生态过程。的各种元素(例如,H, C, N, O,年代,老,和Ba)可以作为自然的标记,或元素可以人为的管理。沉重的光稳定同位素的比率变化的特定元素(表示为δ2H,δ13C、δ15Nδ18O,δ34S,或87老sr / 86)可以测量高度的准确性和精度,可以用于识别和跟踪这些化学元素的来源在动物个体,种群或生态系统。

可能需要获得鱼组织,镇静(见部分7.11限制鱼类:镇静剂和相关的化学物质)或牺牲是必要的。根据研究的目标,不致命的抽样可能通过使用尺度,分段鳍射线或刺,鳍剪辑,或肌肉组织样本获得小活检打孔稳定同位素分析。抽样的耳石新陈代谢惰性结构也很常见。结构如耳石或鳍射线或刺提供调查的序时记录同位素签名和跟踪运动的机会和/或食物来源通过生物体的寿命(查普曼et al . 2013年)。不同类型的代谢活跃的组织有不同的元素流动率;因此,每个调查员必须确定哪些组织可能提供的材料需要满足的需求研究。代表信息的使用稳定同位素在动物生态学提供了弗莱(2006)和鲁宾斯坦霍布森(2004)。Elsdon et al。(2008)回顾了耳石化学技术来确定环境鱼类的历史。

6.6脂肪酸

在某种程度上类似于稳定的同位素,脂肪酸可以用作生物标记来识别食物网营养途径,捕食关系和移置的相对贡献(远程)与autothonous(本地)输入。脂肪酸作为生物标记物的使用是基于鱼类和其他水生生物的原则是由他们吃什么。一旦食用,脂肪酸可能对能源或biotransformed异化,所以脂肪酸档案内组织倾向于反映膳食脂肪酸概要文件。一些不能合成了脊椎动物(如脂肪酸。,18:2n-6 [linoleic acid] and 18:3n-3[alpha-linolenic acid]) or are not synthesized in appreciable amounts relative to dietary intake (e.g., 20:4n-6 [arachidonic acid], 20:5n-3 [eicosapentaenoic acid], and 22:6n-3 [docosahexaenoic acid]); thus, they are particularly useful indicators of recent nutritional history. As mentioned for stable isotopes, various tissues have different metabolic turnover rates; thus, to be accurate, efforts linking tissue fatty acid profiles with chronological records of feeding behavior involve validation studies to account for establishing rates of profile change. Different lipids classes and tissue types have “signature” profiles making them variably responsive to such changes as dietary intake and environmental conditions. For example, phospholipid profiles tend to include certain saturated fatty acids (e.g., 16:0) and polyunsaturated fatty acids (e.g., 18:2n-6 and long-chain polyunsaturated fatty acids), whereas triacylglyceride profiles tend to have a more diverse fatty acid composition. Traditionally, muscle and liver tissues have been used for analyses, and sacrificing the animal has been necessary. However, adipose fin clips have shown utility for such analyses (M. Young, J. Trushenski, and G. Whitledge, unpublished data). For more information on the role of fatty acids in aquatic ecosystems and the use of fatty acids as biomarkers, see Arts et al. (2009); for more information on essential fatty acids and lipids in fish nutrition, see Tocher (2003).

7所示。实验室活动

7.1一般原则

使用活鱼在实验室条件下需要注意很多细节有关的要求,和公差范围,特定的物种正在研究。可接受的物理设施和充足的水供应必须提供质量好,即使鱼举行只有很短的时间。虽然鱼可能容忍边际设施和条件几个小时甚至几天,持有不到最优条件下会影响研究的结果。人道对待动物也必须维护标准,不管鱼举行的时间长度。

读者应该注意一些第7节的内容并不局限于实验室活动,但可能适用于现场情况,。

7.2隔离,隔离检疫

把鱼带到实验室,设施和计划应该以保证鱼无法逃脱,尤其是不是分水岭本土物种,引入鱼类可以从鱼类存在孤立的身体。每个控股单位应该有自己的一套网和其他设备。设施和设备用于先前的研究应该消毒前使用在新的研究中,通常用氯化消毒剂或另一个Virkon等消毒剂®水生(www.wchemical.com/)。如果引入鱼类可能会携带疾病,尤其是病原体和寄生虫不流行,应该使用quarantine-level设施。检疫要求的程度将随已知或怀疑的严重性疾病代理(参见章节2.5鱼类健康管理:控制病原体和寄生虫)。

个体鱼的疑似疾病应隔离他人以抵消潜在的可能传播疾病。这些鱼应该评估个人专长在鱼类疾病病理学家(鱼或兽医),和适当的therapeutant应该直接应用。提供指导治疗特定疾病的超出了本文的范围。研究者强烈敦促建立工作关系与个人专业知识在鱼类健康与他们可能咨询。

实验nonindigenous鱼类、转基因鱼类或其他转基因鱼是一个特殊情况,需要额外的预防措施来阻止他们逃跑。允许网站访问的国家野生动物机构可能需要举行nonindigenous物种(见部分3.4许可和证书)。特定的障碍可能是类似于用来预防疾病的逃脱特工,但必须开发适合实验室或实验设备的物理特性。美国农业部已经开发了规范的设施和自愿发表的指南(1995年农业部1995 a, b)旨在确保适当考虑潜在的遗传和生态效应的研究活动。这些美国农业部指南(1995 a, 1995 b)帮助确定适当的程序和保障措施,这样的研究可以进行没有对环境造成潜在的负面影响。建议发展设施检查提供指导方针和风险管理程序,适当的位置,建筑密封结构,和非结构化控制策略。机构指南使用转基因或其他转基因动物必须足够变量适应特定场地和一些具体的目标但应足以确保不能发生在洪水或其他自然灾害意外释放或在设备故障。最终,个别科学家负责确保动物的容器。

废水从单位用于保存新引入的鱼应该治疗。至少,废水应该经过屏幕保留任何逃鱼开口足够小,反过来,化学或其他治疗方法应该被应用到杀死所有的病原体和寄生虫如果他们预计到场。设施进行研究对控制疾病代理(参见世界动物卫生组织名单http://www.oie.int/our-scientific-expertise/specific-information-and-recommendations/animal-disease-information/)必须隔离,自给自足的单位进行的研究,必须限制未经授权的个人这些单位的访问。(见附录表2在鱼类和两栖动物的OIE-notifiable疾病)。此外,物理障碍必须有足够的能力以防止流出的水事件,所有持有单位是清空(农业部1995 a, 1995 b)。

许多常见的鱼病原体是机会和存在于几乎所有的环境。一些难以避免(例如,黄杆菌属columnare,columnaris疾病的病原体);其他人是专性病原体和只能生存在有限的一段时间,如果他们不是在宿主鱼类(如病毒性出血性败血症病毒(VHSV)基因型IVb在五大湖和圣劳伦斯河司长委任)。尽管研究者可以减少问题机会病原体通过勤俭持家,专性病原体必须避免。这通常可以通过建立一个完整的健康管理计划与普通鱼鱼适当合格的卫生专业人员健康检查。调查员必须意识到某些疾病和代理问题在特定的地理区域进行工作(例如,VHSV IVb)司长委任,应该敏锐地意识到新出现的疾病。美国农业部国家入侵物种信息中心是一个特定的微生物资源(http://www.invasivespeciesinfo.gov/microbes)。无论如何,实现生物安全协议是一种有效的策略来减少,如果不消除,无处不在的风险传播本地化或病原体入侵物种。因此,生物安全(参见3.2节生物安全)是一个重要的领域和实验室研究,考虑是否严格的生物安全协议特别规定(例如,当处理OIE-notifiable鱼病原体包括或有害鱼类;看到附录表2物信息有害野生动物http://www.fws.gov/injuriouswildlife/)。

全面的生物安全计划可以远远超出简单的消毒程序,包括各种各样的主题信息,如控股设施布局和设计,鱼采购检疫和记录(见部分3.2生物安全)。什么是有效的生物安全会有所不同从一个设置或研究场景到另一个地方。指南使用药物、生物制剂在水产养殖和其他化学品(AFS鱼文化2011节,http://www.fws.gov/BOB国际体育fisheries/aadap/AFS%20FCS%20Guide%20to%20Drugs.htm)提供额外的信息和资源相关消毒和生物安全实践。包含在本文档是一个表总结的各种消毒剂(如碘、醇、氯)这可能是用于现场装置和硬表面可能接触到水生动物(AFS鱼文化部分2011)。

7.3适应实验室环境

在研究开始之前,鱼应该给时间来适应新环境(见5.8节场适应),提要,和日常活动。慢适应改变往往是至关重要的(Casebolt et al . 1998年)。非常不寻常的鱼表现出急性健康问题转移后48 - 72小时。时间用来适应内部和之间的实验应该是一个物种的标准和具体。初步研究可能需要建立最合适的时间使用单独的研究。一个常用的适应周期是1 - 2周。

为缓解担忧微生物菌剂鱼转移到实验室的时候,福尔马林可以应用在25 mg / L作为长期浴与持有额外的曝气系统。福尔马林增加了化学需氧量在分解在12 - 24小时后管理。福尔马林浴通常在每周重复间隔3周在最初的鱼持有期。盐是另一个可以使用的化合物。如果鸡蛋或眼鸡蛋从野外带进实验室,其他消毒剂如碘、过氧化氢,或者可以使用福尔马林。调查人员可以参考蓝皮书(AFS-FHS 2012)具体疾病的代理人,鱼类,并建议方法。

调查人员应该注意到实验室持有条件可能会导致动物的生理变化了。即使没有视觉压力可能存在的迹象,免疫抑制(米勒和特里普1982)或损失可能发生潮汐或昼夜节律性。(见部分4.2压力。)

7.4设施长期住房的鱼类

实验室文化系统是基于各种各样的设计,从几个水族缸大系统完整的水族缸,调心,和池塘。许多鱼类有各种各样的需求;因此,实验室应设计得灵活,适应所有物种的潜在利益。通常,系统排列为主要材料,具有恒流新鲜水(“单程”);然而,设计良好的和适当的操作循环系统能保持足够的水甚至优质(马龙和比彻2000;参见7.8水再循环单元)。

文化系统将根据物理实验室的大小不同,水的可用性,鱼类,动物的数量和密度测试(见部分7.5密度的动物),和成本的考虑。鱼可以提高和维护成功在许多类型的系统,但也有最佳条件每个物种(见5.7节临时设施和维护)。在设计,减少压力应保证质量研究动物的最重要的一个因素。足够的水流提供体积和流量模式将提供足够的溶解氧和冲洗代谢废物(Piper et al . 1982年)。还应该考虑消除或至少减少疾病的潜在传播代理在一个系统中。不仅物品如网和其他实验室设备应怀疑作为病原体的传播工具,但是空气气溶胶含有病原体的运动也重要手段的鱼病原体可能传播(伍斯特和水槽1996;主教et al . 2003;参见7.2节监禁、隔离和检疫)。实现病原体的控制措施是鱼类生物医学研究机构的重视,因为潜在的疾病或慢性感染会影响宿主的生理和其他研究端点(劳伦斯et al . 2012年)。

设施的设计和建造得很差会阻碍研究活动,因为他们不能保持所需的质量,数量,尺寸,或物种的鱼。水的质量和数量可能变得无用鱼如果管道和阀门释放重金属或其他污染物进入水(Brauhn和Schoettger 1975;也看到部分7.7水质)。(次优水质和污染化合物可以影响生理参数和行为)。地漏应大量并适当间隔;地板不需要不受水中,但应防滑。接地故障中断电气连接将保证动物和人员安全。日志的书对设备的检查和维护,以及动物饲养和记录通常是在使用房屋设施。建筑材料,可减少接触潜在的有毒物质。合适的建筑材料控股系统组件(例如,坦克、阀门、交付,和排水管)包括玻璃、316型不锈钢、尼龙、碳氟塑料、混凝土(ASTM 2013),聚乙烯薄膜,刚性PVC,聚四氟乙烯®和玻璃纤维(美国陆军工程兵团1991)。黄铜、铜、铅、锌、应该避免和橡胶(ASTM 2013),应该会腐蚀的物质(霍金斯1981年)。定期监测水质是至关重要的部分7.7水质)。系统设计用于海水鱼类将需要额外的注意有关盐度和潜在的腐蚀的影响因素,但同样的一般设计考虑上面所讨论的是适用的。

7.5密度的动物

鱼的密度,可以在实验单位取决于一系列的环境因素。最直接的问题是保持溶解氧和水温度和海拔(Piper et al . 1982年)。积累的废物,特别是氨,通常是第二因素限制密度(Piper et al . 1982年)。需氧量和排泄氨量直接相关的鱼饲料供应。进给量是反过来由鱼的数量和大小的单位。一般来说,材料系统可以维持鱼的密度大于静态单位因为不断的补充溶氧和氨的去除。然而,珠过滤技术用于再循环系统增加了鱼的密度,可以维护(马龙和比彻2000;参见7.8水再循环单元)。静态单位必须配备曝气和木炭过滤设备如果鱼的密度大于最低水平能否持续通过直接大气交换。一般来说,需要保持溶解氧浓度接近饱和,对大多数物种而言,从来没有低于5毫克/升。氨浓度应该接近于零的水平,特别是在高pH值(见部分7.7水质)。生理压力、对疾病的易感性代理和疾病传播代理时必须考虑额外的因素,建立了密度水平。

鱼因物种的不同而异,甚至在一个物种,拥挤的程度,他们会容忍行为模式中断之前。没有提供具体的指导方针,但拥挤的潜在影响应该被包括在每一个研究设计(Piper et al . 1982年)。一般来说,实际密度是由水处理和饲料交付系统,达到最大密度取决于社会互动。这个“社会”可以非常高的教育种类,假设溶解氧水平,其他水质因素和喂养问题已经解决。调查人员和IACUCs警告识别合适的密度不同物种的变化和特定的研究。没有标准,优先适用于所有物种密度。

7.6提要和喂养

尽管大多数物种的成年鱼能生存几个星期没有食物(特别是在低温下),他们必须提供食物是美味,满足基本的营养需求,以保持令人满意的状态作为研究对象。迁徙的鱼类或其他鱼类的展览禁食作为一个正常的一部分生命周期或行为可能这个一般规则的例外情况。回顾一个物种生活史可以提供关于喂养指导要求。如果不知道营养需求和生活阶段,一个平衡的混合物品中发现物种的个体自由放养的饮食应该提供足够的营养。它不能被认为提供天然食品,尤其是一个类型,将完整的人工鱼的营养需求。一些物种可以训练相对轻松地接受配合饲料,从而消除固有的问题提供天然食品,如成本高、不便,无意的病原体的介绍。

制定饲料可以将提供这些饲料的营养需求的物种被设计出来,特别是制造特定的规范(开放的公式)的成分之一。虽然人工鱼经常会消耗饲料为其他物种(例如,食肉鱼将消耗饲料开发彩虹鳟鱼),他们的营养需求不得满足如果这样的饲料用于长时间的。商业,制定饲料通常不是基于一个特定成分(封闭公式),但是,相反,是为了满足广泛的蛋白质营养需求,碳水化合物,和脂肪。具体成分选择履行保证分析描述提供的饲料批次的差异很大,即使直接成分(蛋白质、碳水化合物、脂肪)保持不变。因此,饲料可能满足整体大量营养素的要求(如蛋白质),但最优水平的特定营养成分(例如,必需氨基酸)为每个鱼类可能并不总是得到满足。调查人员必须考虑变化的可能影响成分的生理实验对象的研究设计(巴罗斯和哈迪2001)和考虑咨询营养学家在选择饮食配方饲料制造商或鱼。切换饮食可以影响实验动物(加特林2010;南部地区水产养殖中心看到事实表是可用的https://srac.tamu.edu/index.cfm/event/viewAllSheets/)。

提供饲料的数量会随食物的营养和能量,以及年龄和大小的鱼,和环境条件,特别是水温。喂饱食是正常做法,除非研究设计或其他物流决定减少喂养率。美联储制定饲料的重量,每个制造商的指示,通常是低于所需的天然食品,因为制定饲料水分含量低于天然食品。一般来说,制定饲料喂养水平从1%到8%不等的鱼的重量,根据水温和物种,鱼的大小和年龄。最佳的喂养时间取决于种专一性行为但通常可以被修改,以适应鱼看护人的合理安排。如果鱼的物种通常在夜间或黄昏和黎明提要,它希望提供饲料的时候,他们会自然饲料。大多数制定饲料可以由多种机械食或喂食器由鱼本身的需求。喂养的方法结合放养密度可能行为的不同影响和压力(阿迪et al . 2012;参见7.5密度的动物)。喂养习惯化,这样可以防止机器有潜力的鱼饲养人员的存在,允许灵活地喂养时间表。过量吃饲料应该从一辆坦克在很短的时间内喂养后,因为它减少水质和可以支持真菌生长。水质将减少累积的饲料,和水溶性营养素会从用水浸淋溶丸。

7.7水质

提供适当的物理和化学的水质量的最重要的因素可能是人工鱼的维护与保养。因为每一个25000 +的鱼类物种都有自己的最佳条件和公差范围,调查员负责确定条件下物种研究的首选。将鱼转移到水温度公差范围外,或超过他们的适应能力,可以导致死亡,要么立即或延迟,通常在72小时内。水温度的突然变化,小如5°C可以导致鱼类的应激反应是健康的。经验丰富的调查人员不定期公开鱼对温度变化超过每天2°C。公差范围和能力承受温度变化影响个体鱼的以前的热历史以及物种特征(卡迈克尔et al . 1984;贝尔卡1986)。

有毒物质在水中的存在或缺乏足够的溶解氧会导致立即死亡鱼放置在这样的水。慢性水质问题,如亚硝酸盐水平升高,可能不会引起明显的反应,但严重影响鱼的生理和研究成果。引入鱼之前,水供应用来保存鱼应该分析参数如硬度、碱度(缓冲能力),主要的阳离子(Na1 +K1 +、钙2 +、镁2 +),主要阴离子(有限公司32 +,Cl1 -,HCO31 -,所以42 -)、重金属和农药。习惯,定期监测温度、溶解氧、氨、碱度、亚硝酸盐,pH值应进行。在柔软的水,或水缓冲不好,大量的pH值的变化可能会导致不利影响。Un-ionized氨是有毒鱼类和压力甚至死亡的一个原因,尤其是在更高的pH值。增加缓冲代理可能被批准在这些情况下。温度和海拔高度对水质参数的影响必须已知和设法保持在可接受的条件限制(博伊德1985;Avault 1996;柯尔特和托马斯·2001)。

市政水或任何供应,氯化应定期监测特别是游离氯可产生直接的毒性反应。脱氯设备,如活性炭过滤器和化学物质(例如,硫代硫酸钠)商用可以减少自由氯浓度检测不到。即便如此,非常低浓度的氯副产物或代谢物可能仍在水里。这些化学物质通常不会引起短期不利影响,但应该考虑潜在影响,以及他们的浓度监测是否会影响结果。

污染物在水中有可能影响鱼类的生理特点,和鱼类中经常使用的生态系统监测项目(见部分5.2.3代表性样本)。例如,水下游污水处理厂和工业来源可以包含内分泌调节器或干扰(例如,Arukwe 2001;Kolpin et al . 2002;詹金斯et al . 2013年)。越来越多的证据表明,饮用水本身可能包含各种个人护理产品和药物,尽管在非常低的浓度(Benotti et al . 2009年)。

7.8水再循环单元

在水产养殖水再循环系统的出现在过去的三十年里鱼养殖者和调查人员提供了一些好处。大量供水需求和特定的气候条件所要求的传统鱼文化系统被淘汰;鱼类一年四季都可以生产和维护,和环境影响的有机废水排放减少(见部分7.9废水和许可)。再循环技术已用于连续加载鱼密度很高(Van Gorder 1991;马龙和比彻2000)和其他目的,比如孵化场虾Macrobrachiumsp.养殖和成熟(Millamena et al . 1991年)。

再循环系统的效率取决于其设计中使用的组件。通常,每个系统将与生物过滤的功能,包括单位澄清的固体,曝气,pH值控制,减少生物需氧量,水循环,和维护适当的碱度,氨氮和亚硝酸盐氮的水平。生物滤池、生物过滤器,中央再循环水产养殖系统的组件。额外的部件可能包括水泵、坦克、澄清器,曝气和氧化组件,紫外线消毒器或臭氧化发电机,污水坑。备用电源在电源故障情况下的资产。

几种类型的生物过滤器是可用的。硝化效率最高的那些功能最好控制氨和亚硝酸盐水平。(通过硝化细菌等属亚硝化单胞菌,硝化螺菌属,硝化菌属氨去除的过程,包括连续氧化氨硝酸亚硝酸盐最后)。为了建立一个活跃的硝化细菌数量的生物滤池的先决条件必须在一段时间内几周之前储存密度高的鱼。最大的硝化能力较低盐水比淡水系统系统;然而,适应高盐度的淡水生物过滤器可以提供一个工具,缩短启动时间的海水系统(Nijhof和Bovendeur 1990)。

再循环系统设计和操作时,应开发管理计划维护系统的功能在异常条件下如疾病暴发。生物过滤器可杀死细菌的抗菌药物治疗,驱虫剂(阿et al . 1995年)。适当的启动过程和预处理是必不可少的鱼引入之前再循环系统。

7.9废水和许可

设施保持鱼会产生废水,这些废水的潜在影响在接收必须考虑生态系统。废水排放连续或定期可能结合其他废水,并可能直接排放到污水处理厂或其他市政排水系统或湿地,但是最终,他们将搬到一个公共水体。大多数废水湿实验室可以安全地添加到处理厂甚至公共水体。

监管机构和决心接受废水贡献建立最初的EPA或EPA-delegated权威等国家权威(Hindrichs和Cormier 2009)。废弃物或污染物排放进入水域的美国需要一个国家污染物排放消除系统(npd,http://cfpub.epa.gov/npdes/)许可证。npd允许指定可以安全地排放的污染物和浓度。污染物不确定允许禁止排放。这类许可证通常由一个研究机构,除非发生排到污水处理设施。在后一种情况下,治疗设施将npd许可证。个人npd许可证所需直接放电器如渔场。渔场是环保局指定的集中水生动物生产设备根据其大小和类型的鱼生产(CFR 2000)。冷水鱼设施,如鳟鱼和鲑鱼的农场和孵化场(家庭鲑科),每年生产9090公斤的鱼或饲料每月2272公斤的鱼,被归类为集中水生动物生产设施,需要npd许可。温水设施排放废水每年30天或每年生产超过45454公斤的鱼也需要npd许可。较小的水产养殖设施可能需要许可证。 Investigators conducting tests in aquaculture facilities where an undeclared pollutant, such as a new drug treatment, might be discharged need to contact the EPA or its designee to determine safety. Often, the facility operator will need to amend their Notice of Intent (NOI) to be covered under a particular NPDES permit to include the new drug in their discharge (see section7.11限制鱼类:镇静剂和相关的化学物质)。无法获得放电批准前放电导致违反了清洁水法案(美国法典2002),会导致大量的罚款和监禁。

7.10危险的物种和标本被囚禁

除了5.5节中提供的建议危险物种和标本,调查人员持有危险物种在实验室条件下应提供特殊的控股单位设计控制的具体问题提出了危险的动物。与现场研究,个人工作在实验室与危险物种必须提供培训和个人防护设备,解决特定问题每个物种,和个人不应该独自工作。开始之前进行调查或住房危险物种,必须开发一个正式的工作危害分析。这个分析是主要研究者之间的合作努力,该研究所的环境健康和安全官和IACUC专门咨询IACUC的兽医。这个工作危害分析(见https://www.osha.gov/Publications/osha3071.html)将考虑到任何可能的信息可以从行业和/或联邦政府机构熟悉这些问题,物种,标本。

7.11限制鱼类:镇静剂和相关的化学物质

长时间,压力克制应该避免。在某些情况下,一般镇静克制可能是可取的(曼迪和威尔逊1997);然而,镇静的好处和潜在影响的数据来源于镇静鱼类可能需要从鱼类相比,结果没有被抑制的。全方位的潜在影响的鱼,而不仅仅是镇静剂的品质,必须考虑。镇静选择应该是,允许快速恢复正常生理和行为状态(史密斯et al . 1999;出版和Trushenski 2011),是一种低风险的化合物对人类以及鱼类。化合物应该测试在一个小样本的鱼之前广泛使用。必须保持镇静动物观察到适当的复苏。

下列物质已经被各种调查人员使用(有些是受控物质只能通过适当授权的来源,比如兽医):苯坐卡因,丁香油,安定(安定)、钠pentobarbitol,三卡因显示(ms - 222)。体温过低和亚致死的风险水平的有限公司2(一种含碘药物;参见5.4.2监管低优先级(含)的药物附录表1)已被用于其他镇静剂禁忌的情况下。唯一的镇静剂FDA批准的一般用在鱼是ms - 222,但需要21天的戒断期在治疗之前鱼可能被释放或被人类。

FDA允许调查人员一定程度的选择的选择和使用药物,包括镇静剂,如果鱼仅研究,不用于消费或释放。FDA的严格解释政策允许这种选择只批准药物排出的药物研究符合当地npd许可证;不过,执法实践通常允许更大的灵活性(见部分7.9废水和许可)。FDA兽医中心(CVM,http://www.fda.gov/AnimalVeterinary/default.htm)或物AADAP计划(http://www.fws.gov/BOB国际体育fisheries/aadap/home.htm)可能是联系来确定当前实践和优先级。

FDA药品审批相关的复杂性和实验使用的药物在最近的研究证明了行动与丁香油。丁香油,以任何形式,不得用于鱼类,可以被人类,即使治疗发生在实验室设置。这包括濒危物种或品种,否则可能释放到公共水域,他们将用于人类消费。在撰写本文时,只有有限公司2(作为一个单体药物;看到附录表1)和丁香酚(AQUI-S®20 e;下物INAD免)可以用作速镇静剂(参见5.4节字段限制鱼类:镇静剂)。另外,electrosedation或electroanesthesia可能合适的替代chemosedation当鱼需要多次被抑制,当放电chemosedative不可行,或者当鱼需要立即被释放到环境中(Trushenski et al . 2012 a, 2012 b)。

7.12手术

手术,写进许多的研究计划,包括植入设备包括标签和发射器等流程,检查内部器官(如性腺)和删除器官。手术成功取决于过程的复杂性,个人的专业知识和环境的过程。对鱼进行手术,个人需要培训和实践经验。一般来说,渔业生物学家BOB国际体育缺乏正规教育培训手术,这样,培训应该由个人提供了长期的经验,广泛的外科专家,并与鱼类手术成功的记录。正式的培训机会提供机构将有利于研究人员提出使用外科手术。个人适合火车可能与鱼类和有经验的兽医与IACUC,兽医小组成员提供动物卫生监督机构(包括鱼),或一名调查员在外科手术的成功表现的丰富经验与鱼。培训将覆盖手术的原则和指导执行的具体过程。在培训结束后,学员会向老师证明他们有能力进行及时有效的手术相似的程序提出了他们的研究。

书面协议提出手术应该澄清是否手术被认为是一个大手术或小手术。大手术是一个过程,渗透或公开一个体腔,或者手术产生大量物理或生理障碍。大手术的例子有植入无线电发射机的体腔,或脾切除术。小手术是微创,而不是穿透或暴露体腔或生产大量的物理或生理障碍。小手术的例子包括放置导管在肌肉血管或植入坑标记(见部分6.3内部标签和标志,生物遥测术)。

鱼需要手术的水生性质与non-aquatic动物不被认为是惯例。身体的鱼不受表面角质化皮肤,而是由多种活细胞和粘液,提供生理和免疫的外部障碍。因为许多消毒剂会损害鱼皮肤、完整的手术部位消毒可能是不可能的(Stoskopf 1993 c);手术部位的制备通常由轻轻地清洗的面积过多的粘液。努力避免污染手术,手术后的感染是非常重要的。

物流的现实的、务实的问题必须考虑无菌外科发展的协议,在现场执行与装备精良,设计实验室或手术套件。能够使用所有的外科无菌技术(例如,使用礼服,面具,褶皱)受环境影响手术的进行。是否手术的类型被认为是一个主要或次要过程尤其相关,当大量的鱼将接受手术,必须在远程位置。报告记录调查技术,支持成功的手术non-laboratory条件下鱼(Jepsen et al . 2013年)。这些报告记录可能在手术仍被视为合理的偏差导致手术成功。声明在NRC(2011: 115),“可能需要修改标准技术(例如,在水生或字段手术),但不应该妥协动物的福利,“密友主调查员是务实的。

调查人员应审查发表的研究与程序他们建议执行。一个领域一个偏离标准手术可能是适当的消毒鱼之间的工具。在偏远的位置,要处理大量的鱼,它可能不能访问一个高压蒸汽灭菌设备或其他标准。在这种情况下,仪器消毒之间鱼类可能是由仪器沉浸于1:1,000苯扎氯铵溶液或其他季氨化合物(Summerfelt和史密斯1990)和70%的乙醇,然后在无菌水清洗工具使用。其他选项处理手术器械手术之间热珠灭菌器或紫外线系统(沃克et al . 2013年)。组合的方法可能是适当的。在所有情况下,手术团队应该努力最好的避免污染手术领域的能力。

根据(即使用的麻醉剂。,MS-222) and whether the fish will be stressed during a post-surgery holding period, temporary confinement may be necessary for a withdrawal time prior to their release into the environment, as they may be caught and consumed by the sport fishing community (see section5.4.1之前药物批准用于鱼)。因为手术的多样性,在鱼,可能执行指南中提供的信息并不打算提供一个详细的指南鱼手术。更多细节可以发现阻碍et al . 2010年,Stoskopf 1993 c, Summerfelt 1990年史密斯,史密斯和贝尔1967,伍斯特et al . 1993。外科手术植入的信息中发现利特克等。2012年,Chomyshyn et al . 2011年,库克et al。2011年,布朗等人。2011年,瓦格纳et al . 2011(见部分6。标志和标签)。

一般来说,上市,必须处理动物濒危物种,如果手术要做,需要一个许可证(见部分5.2.4濒危物种的集合)。

7.13管理药品,生物制品,和其他化学物质

研究人员使用鱼药物、生物制剂、和其他化学品后负责联邦、州和地方法规。仔细记录要保存记录每次使用。

7.13.1药物

联邦食品、药品和化妆品法案》(2013年使用行为,http://www.fda.gov/RegulatoryInformation/Legislation/FederalFoodDrugandCosmeticActFDCAct/default.htm)定义了药物,在某种程度上,他们的用途,“文章用于诊断、治疗、缓解、治疗或预防疾病”和“文章(除了食物)旨在影响结构或任何人类或其他动物的身体的函数。“根据这些定义,几乎任何产品管理一条鱼被认为是药物。所有药物用于控制死亡率与细菌性疾病或感染寄生虫的密度有关,稳重或麻醉鱼类,诱导产卵,改变性别,或改变水生物种的结构或功能必须得到FDA的批准。冰,一种无害的化合物,因此被认为是一种药物,因为它减缓新陈代谢率,和盐被认为是药物渗透调节的影响。FDA批准的药物化合物的数据已经被CVM评估(附录表1),因为他们的结论是有效的在达到规定要求,包括安全目标鱼,人处理活性成分或消费的鱼,当应用于标记剂量和环境。药物必须根据FDA CVM标准制造,包装和标签的方式,以确保使用合规。FDA要求调查人员可以提供全面的记录使用的药物。

目前,没有药物,是“有条件批准”用于鱼。有条件批准允许合法药物销售前完成数据收集由FDA和验收。条件药物的批准意味着化合物出现安全,根据FDA CVM标准生产,并显示效果;然而,复合一般不普及。非法毒品使用鱼包括(1)使用未经批准的药物为任何目的或(2)使用批准药物的方式除了在产品标签中指定(除非上市INAD豁免或除非用法的规定许可兽医)。州际运输未经批准的药物的使用在任何动物,包括鱼类,是被禁止的。额外的信息可以获得批准和临床实验的新动物药物AADAP (http://www.fws.gov/BOB国际体育fisheries/aadap/home.htm)或FDA CVM (http://www.fda.gov/AnimalVeterinary/default.htm)网站。规定允许使用的药物在动物教学设置,所述1976年病死率。

注册兽医有权开出头孢菌素(参见2.5节鱼健康管理:控制病原体和寄生虫)使用毒品。一些化学物质只能通过兽医合作管理(例如,Chorulon®、兽医饲料指令药物)。

7.13.2生物制剂和其他化学物质

使用“生物制剂”与鱼类一般指疫苗、菌苗、抗血清、诊断工具,和其他产品的生物起源。这些兽医和研究产品用于诊断、预防、治疗动物疾病,和一些许可,商业生物制剂批准用于鱼。用于水产养殖,看到美国农业部蚜虫项目援助1713号兽医生物制品:使用和监管(美国农业部2013年,http://www.aphis.usda.gov/publications/animal_health/content/printable_version/vet_biologics.pdf)和长须鲸水产养殖中使用疫苗(Yanong 2011,http://edis.ifas.ufl.edu/fa156),更多信息见农业部兽医中心蚜虫生物制剂(CVB)网站(http://www.aphis.usda.gov/wps/portal/banner/help?1dmy&urile=wcm%3Apath%3A/APHIS_Content_Library/SA_Our_Focus/SA_Animal_Health/SA_Vet_Biologics),负责监管产品,AFS鱼文化部分指南使用药物,生物制剂,在水产养殖和其他化学品(AFS鱼文化2011节,http://www.fws.gov/BOB国际体育fisheries/aadap/AFS%20FCS%20Guide%20to%20Drugs.htm)。

7.13.3化学工厂反恐标准(CFATS)

某些水产养殖药品可能存在安全问题如果他们被释放,被盗,转移或用于破坏或故意污染的目的。设备存储这些化学物质可能由美国国土安全部(DHS,http://www.dhs.gov/)根据化学工厂反恐标准2007 (CFATS,http://www.dhs.gov/chemical-facility-anti-terrorism-standards)。设施,制造、使用、存储或发布某些化学物质达到或超过指定数量可能监管。每个工厂负责评估自己的化学使用模式和决定哪些CFATS。国土安全部已经发现了超过200种化学物质利益(2007年联邦公报,http://www.dhs.gov/xlibrary/assets/chemsec_appendixa-chemicalofinterestlist.pdf);一些特别关注渔业研究机构包括BOB国际体育

  • 福尔马林(甲醛解大于或等于1%解决方案和大于或等于15000英镑。
  • 氢peroxide-when大于或等于35%解决方案和大于或等于400英镑。
  • 钾permanganate-when商业级,大于或等于400磅。

设施可能需要开发一个网站安全计划如果它决心由国土安全部(高风险www.dhs.gov chemicalsecurity)。

8。实验动物的最后处置

8.1安乐死

有几种方法可用于使安乐死鱼类。各种监管或授予机构可能需要特定的安乐死方法和书面协议,能够表现出足够的关注人道对待。一些方法列出了安乐死在美国兽医医学会(兽医)安乐死的动物指南:2013版(2013年兽医,https://www.avma.org/KB/Policies/Documents/euthanasia.pdf),一般考虑的指导的护理和使用实验动物(2011年NRC)。

一般来说,程序必须快速执行调度之前和用最小的压力。脊椎错位或斩首通常是可以接受的方法,提供了快速、准确地执行程序。一些IACUCs批准协议,小鱼(< 5厘米的总长度)可能是安乐死冷打晕在冰浴(威尔逊et al . 2009;祝福et al . 2010年)。小型鱼类可能会被浸泡在液氮安乐死立刻镇静谢弗(1997);然而,这种方法和其适当性应该讨论IACUC或其他监督机构之前使用。根据鱼的大小和实验的需要,某种形式的物理麻醉,如体温过低,可能表示之前安乐死。冷休克和电击一般鱼处理器准备大量的屠杀动物,鱼可能是商品而不是研究标本。少量的鱼可以通过接触较高浓度的安乐死镇静剂如ms - 222;然而,使用ms - 222(2013年兽医,https://www.avma.org/KB/Policies/Documents/euthanasia.pdf)和其他化学镇静剂安乐死没有被FDA批准的代理,而这些化学安乐死鱼类可能不是供人类或动物消费。参见7.11限制鱼类:镇静剂和相关的化学物质。看到Coyle et al。(2004)和水生动物麻醉剂使用,包括剂量使用一般养殖鱼类(简报3900年在南部地区水产养殖中心https://srac.tamu.edu/index.cfm/event/getFactSheet/whichfactsheet/162/)。安乐死通过简单的缺氧(脱水)有时练习在规定的人口减少的生产级设施;然而,这个过程是不推荐的研究情况。惊人的电击之后,建议选用快速斩首或冷休克必须安乐死如果大量的鱼类。鱼藤酮块耗氧量,已有用例发生意想不到的超级跑车(雷纳和短剑2006)(见部分5.2.3代表性样本)。选择安乐死的方法应该在配合机构IACUC。所提供的附加信息是佛罗里达大学的推广服务,地方出版物鱼宰杀的解决方法,杀死,综述了安乐死(Yanong et al . 2007年,http://edis.ifas.ufl.edu/pdffiles/FA/FA15000.pdf)。

海洋鱼类调查在海上出现一组特殊的条件对安乐死。捕捉方法往往会导致大量的标本收集。关于性的信息,性成熟、和胃内容可以获得来自个人,加工时没有死。斩首或从中取髓的个体鱼耳石去除可能用于这样的调查,但这些技术并不适合处理大量的鱼。的最大可能部分赶上必须工作在最短的时间内获得最大的数据量在每个车站或抽样事件。安乐死的人可能导致重大妥协收集的数据的数量。除了某些鲨鱼(子类板鳃亚纲),或受威胁的物种,如海龟(家庭Chelonidae)和鲟鱼(家庭鲟科),整个捕获可能被视为不重复抽样。在这种情况下,约束的时间和成本的船时间,调查人员和机构可能被授予豁免标准实践安乐死。

8.2存储或恢复水生栖息地

动物使用应用程序提交IACUCs通常需要描述性格的首席研究员鱼或鱼的尸体。不管是否需要,选择实验对象的最终处置应划定研究计划。鱼在野外收集和带进实验室实验或教学目的不应该返回到环境根据科学收集许可机构授予的一般共识。适当的euthanization和保存后,再次研究动物可能是有用的作为教学或凭证标本研究集合(见部分5.2字段集合)。联邦、省级、州或当地法律禁止发布的研究动物在任何情况下。外来鱼类不应该被释放。在某些情况下,转移到另一个研究项目或教育运动可能是一个适当的处置,并允许在联邦政府的情况下可能需要列出的标本。如果可用适当的处理标准操作规程,他们可以遵循,除了相关研究机构和地方政府制定的指导方针。

9。未来修订

定期修订(大约每5 - 8年)的指导方针将是必要的,最好由一个多学科委员会解决。虽然科学方法的基本理念相当恒定,特定的技术和程序研究调查的发展随着时间的推移,有时相当迅速。调查人员正在鼓励发送新信息和建设性的批评各自的社会人员。

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附录

IACUC准备简短的清单

以下清单提供了一个快速参考的因素,调查人员应该考虑在准备计划(IACUCs)动物保健和使用委员会制度(见2.1节IACUCs)批准的研究计划。这个清单不应作为替代指南中提供的更详细的信息,但可以用于记录,确保计划完成。

  • 分类单元的选择
  • 数量和个体的选择
  • 文献检索
  • 人口和遗传因素
    • 俘虏/国内股票
    • 野生种群
    • 威胁或濒危物种
  • 动物福利
  • 生活条件和适应环境
  • 水的质量
  • 食品、饲料和饲养
  • 健康
  • 压力
  • 应急准备
  • 镇静
  • 安乐死
  • 许可法规

列表管理优先级低的药物和考虑他们的使用

尽管技术上未经批准的用于鱼、低管理优先级(含)药物(附录表1)化合物,美国食品和药物管理局中心兽医(FDA CVM)认为风险比较小的水生生物,人类的消费者,或环境。FDA CVM已经表示,它不太可能调节使用含碘药物如果满足以下5个条件:(1)物质是用于上市的迹象,(2)使用的物品在规定的水平,(3)使用的物品根据良好的管理实践,(4)物质是在食用动物中的使用一个适当的年级,和(5)不可能有一个对环境不利影响。

附录表1。监管低优先级水产养殖药物适应症、剂量。

复合 指示(s) 剂量
醋酸 驱虫剂对鱼 1000 - 2000 ppm浸1 - 10分钟
CaCL2 用于鸡蛋adhesionUsed援助维持渗透平衡在鱼和运输 10 - 20 ppm CaCO3(鸡蛋)≤150 ppm CaCO3无限期(鱼)
外部protozoacide鱼 2000 ppm,持续5秒
有限公司2气体 麻醉鱼
漂白土 用来减少鱼卵的粘合度
用于在运输过程中减少鱼的新陈代谢率
MgSO4 用于治疗外部单基因吸虫或甲壳类动物的侵扰,在鱼 30000 ppm MgSO4+ 7000 ppm生理盐水浸5 - 10分钟
木瓜蛋白酶 用于去除凝胶矩阵从鱼蛋质量 0.2%的解决方案
氯化钾 用于在渗透调节,缓解压力,防止休克的鱼 10 - 2000 ppm氯化钾
聚维酮碘 鸡蛋表面消毒剂 100 ppm 10分钟期间或之后水硬化
NaHCO3 用于介绍公司2成水麻醉鱼 142 - 641 ppm为5分钟
生理盐水 作为渗透调节的援助来缓解压力,防止冲击fishParasiticide吃鱼 0.5% - -1.0% indefinitely3% 10 - 30分钟
Na2所以4 用于提高鱼卵的孵化率 15%解决方案5 - 8分钟
盐酸硫胺素 用于预防或治疗硫胺素缺乏症在大马哈鱼 ≤100 ppm≤4小时在水中硬化≤1000 ppm≤1 h (sac-fry)
尿素和丹宁酸 用来减少鱼卵的粘合度 沉浸在3 ppt尿素+ 4 ppt氯化钠~ 6分钟紧随其后的是单独的沉浸在150 ppm鞣酸~ 6分钟(将大约4000000个鸡蛋)

附录表2。OIE-notifiable诱发疾病代理鱼类和两栖动物。

鱼病药物

丝囊霉属invadans(真菌)

是其中之一(寄生虫)

家畜流行病造血的坏死病毒

传染性造血的坏死病毒

传染性鲑鱼贫血病毒

锦鲤疱疹病毒

红鲷鱼虹彩

春天鲤鱼病毒的病毒血症

病毒性出血性败血病病毒

两栖动物疾病药物

壶菌

Ranavirus

办公室国际des既往发表他们当前在水生动物卫生代码列表http://www.oie.int/index.php?id=171&L=0&htmfile=titre_1.10.htm

索引术语和缩写

AADAP(水生动物药品批准合作项目)………………………………………5、27

AFS(美国渔业协会)………BOB国际体育……………………………………………………………………第六、八世2

AIFRB(美国渔业研究所的生物学家)……………………………………………。第六,2

蚜虫(动植物卫生检验服务)……………………………………………………14日,52岁

ASIH(鱼类学家的美国社会与爬虫类)…………………………………………第六,2

兽医(美国兽医医学会)…………………………………………………………。53

CFATS(化学工厂反恐标准)………………………………………………………。52

引用(国际濒危物种贸易公约野生动植物)。8、14

国土安全部(Department of Homeland Security)……………………………………………………………………52岁,53岁

DNA(脱氧核糖核酸)………………………………………………………………………………………36、37

EPA(美国环保署)……………………………………………………。4、5、7,8,47岁

FDA(美国食品和药物管理局)……………………………………4、5、7,8,27岁,35岁,48岁,51岁,53岁

CVM FDA(美国食品和药物管理局中心兽医)…………现年51岁的48 78

IACUC(机构动物保健和使用委员会)。9,2、3、13、15、20日,43岁,48岁,49岁,53岁,77年54岁

INAD(临床实验的新动物)…………………………………………………………。7日,27日,49岁的51

单体(低优先级监管)………………………………………………………………………7日,27日,48岁,49岁,78年

女士- 222(三卡因显示)……………………………………………………………25日,27日,48岁,50岁,53岁

国家卫生研究院(National Institutes of Health))……………………………………………………………………………………2

NOAA(美国国家海洋和大气管理局)………………………………………………23

npd(国家污染物排放消除系统)……………………………………………47、48

世界动物卫生组织(世界动物卫生组织[原办公室国际des既往])9日12,69

小灵通(公共卫生服务)……………………………………………………………………………………………。12

坑(被动综合应答器)……………………………………………………………………………34、35

PQAP(项目质量保证计划)……………………………………………………………………………。4

SOP(标准操作程序)………………………………………………………………………3,4,5,28

SRAC(南部地区水产养殖中心)……………………………………………。27日,31日,44岁,53岁,81年

美国农业部(U.S. Department of Agriculture)………………………………………………………12日,13日,40岁,52岁,74年

USDHHS(美国卫生和人类服务部)…………………………………………………2

物(美国鱼类和野生动物服务)…………………………………………………………5日,14日,23日,27日,49

注意额外阅读

2004版本的指南(使用鱼类研究委员会2004年)列出特定引用主题,增加理解和背景下对这些话题。这在这里委员会建议更多的当前信息可以获得使用鱼的研究进行在线文献搜索。此外,相关资源等可能会发现网站的南部地区水产养殖中心(https://srac.tamu.edu/index.cfm/event/viewAllSheets/)。
版权2014年由美国渔业协会BOB中国官方下载BOB国际体育